[產品名稱]小鼠α半乳糖基抗原(α-Gal)ELISA試劑盒
[英文名稱]Mouse α-galactoyl,Gal ELISA Kit
[貨號]ZK-M5063
保存條件:保質期2-8℃低溫保存下,6個月的保質期。
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小鼠α半乳糖基抗原(α-Gal)ELISA試劑盒實驗原理:用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素,經過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
標本的采集及保存
1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過了夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3.細胞培養物上清或其它生物標本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響zui后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
小鼠α半乳糖基抗原(α-Gal)ELISA試劑盒實驗操作注意事項
1.試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存。實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2.加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔之見的時間間隔過大,否則將會導致不同的預孵育時間,從而影響實驗的準確性以及重復性;一般加樣時間控制在10分鐘內,如果樣本數量過多,可使用多道移液器。
3.孵育:樣品要在密閉的容器內進行孵育,嚴格按照說明書上規定的孵育時間和溫度進行。
4.洗滌:洗滌過程中反應孔中的殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,同時要消除板底殘留的液體和手指痕跡,避免影響zui后的酶標儀讀數。
5.反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,10分鐘左右),如果顏色較深,請提前加入終止液終止反應。
6.建議實驗前預測樣品含量,如樣品濃度過高,應對樣品進行稀釋,計算結果時乘以相應的稀釋倍數。
7.建議使用本試劑盒時先做預實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經銷商,如果因運輸過程導致試劑盒失效,可要求調換,但概不承擔產品本身以外的任何損失。
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