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人白細胞共同抗原（LCA/CD45）ELISA試劑盒實驗原理：
用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素，經過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。

ELISA中有三個必要的試劑：免疫吸附劑、結合物和酶的底物等。
完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：
1、已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；
2、酶標記的抗原或抗體（結合物）；
3、酶的底物；
4、陰性對照品和陽性對照品（定性測定中），參考標準品和控制血清（定量測定中）；
5、結合物及標本的稀釋液；
6、洗滌液，在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水；
酶反應終止液，常用的HRP反應終止液為硫酸，其濃度按加量及比色液的zui終體積而異，在板式ELISA中一般采用2mol/L。

人白細胞共同抗原（LCA/CD45）ELISA試劑盒標本的保存：在5天內測定的標本可放置于4℃，超過一周測定的需低溫凍存。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4 ℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本，將標本及時分裝后放在-20 ℃或 -70 ℃條件下保存。避免反復凍融。標本2 -8 ℃ 可保存48小時，-20 ℃可保存1個月。-70度可保存6個月。部分標本也可加入適當防腐劑，激素類標本需添加抑肽酶。 

實驗操作注意事項
1.試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存。實驗操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2．加樣：加樣時，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔之見的時間間隔過大，否則將會導致不同的預孵育時間，從而影響實驗的準確性以及重復性；一般加樣時間控制在10分鐘內，如果樣本數量過多，可使用多道移液器。
3.孵育：樣品要在密閉的容器內進行孵育，嚴格按照說明書上規定的孵育時間和溫度進行。
4.洗滌：洗滌過程中反應孔中的殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，同時要消除板底殘留的液體和手指痕跡，避免影響zui后的酶標儀讀數。
5.反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如，10分鐘左右)，如果顏色較深，請提前加入終止液終止反應。
6.建議實驗前預測樣品含量，如樣品濃度過高，應對樣品進行稀釋，計算結果時乘以相應的稀釋倍數。
7.建議使用本試劑盒時先做預實驗(即先做標準曲線，試用幾個標本)，如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經銷商，如果因運輸過程導致試劑盒失效，可要求調換，但概不承擔產品本身以外的任何損失。

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