細胞:AVV-293細胞
中文名稱:人胚腎細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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寄生蟲在其生命周期中常常經歷顯著的外形變化,
在短膜蟲期(epimastigote)階段,動基體在核之前,而且只有鞭mao的一部分與細胞相連。布氏錐蟲的近親有許多不同的形狀,這表明這些寄生蟲在進化中也改變了它們的形態。
當減少了布氏錐蟲錐鞭mao體的一種稱為ClpGM6的蛋白質表達的時候,這個細胞切換到了一種類似于短膜蟲期的形態。動基體接近核或者在其之前,而且鞭mao的一長部分伸出了細胞。這些寄生蟲與短膜蟲期不一樣——它們缺乏見于這個生命階段的一種獨_特的表面蛋白——但是它們有能力存活并且繁殖超過40代。
ClpGM6位于鞭mao的附著區,而且很可能有助于把鞭毛與細胞體連接。失去ClpGM6導致鞭mao的幫助確定細胞尺寸和形狀的附著區縮短。
讓它們能夠適應不同的生活環境并且繁盛起來。研究發現,這些變形看上去可能沒有看上去的那么困難。非洲的“昏睡病”是一種由稱為布氏錐蟲(Trypanosoma brucei)的由蠅傳播的寄生蟲物種導致的疾病。
這種單細胞寄生蟲擁有一個內部儲藏著這個細胞的線粒體DNA的動基體以及對于細胞運動具有關鍵作用的一個伸出的鞭mao。布氏錐蟲在其發育周期經歷了外形和構成的重大變化。
在一個稱為錐鞭mao體(trypomastigote)的階段,動基體位于核之后,而幾乎鞭mao的所有部分都與細胞相連。
研究提出,在生命周期中以及在寄生蟲進化中出現的顯著形態變化可能是由于幾個關鍵蛋白質層次上的調整造成的,而不是源于寄生蟲蛋白質或DNA內容的大量變化。