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上海研盟生物科技有限公司
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更新時間：2017-11-13 14:00:23瀏覽次數(shù)：135次
聯(lián)系我時，請告知來自 環(huán)保在線“Anti-SYP p38抗體,突觸素抗體/突觸相關(guān)蛋白-1"抗體規(guī)格0.1ml、0.2ml、1ml，抗體產(chǎn)品有效期一年，質(zhì)保三個月，質(zhì)保期內(nèi)出現(xiàn)任何質(zhì)量問題或是出不了實驗結(jié)果均可免費退換：
上海研盟生物科技有限公司Anti-SYP p38抗體,突觸素抗體/突觸相關(guān)蛋白-1*，主要應(yīng)用于WB、IHC、IF、ELISA、流式細(xì)胞術(shù)等實驗中。說明書隨貨發(fā)送，您也可以直接我司在線客服索取?？头?/p>
【中文名稱】：突觸素抗體/突觸相關(guān)蛋白-1
【英文名稱】：Anti-SYP p38
【產(chǎn)品編號】：BYK-0121R
【規(guī) 格】：0.1ml/0.2ml
【相關(guān)標(biāo)記】：Alexa Fluor 350、Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 555、Alexa Fluor 647、AP、APC、Biotin、Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7、FITC、Gold、HRP、PE、PE-Cy3、PE-CY5、PE-CY5.5、PE-CY7、RBITC.
【濃 度】：1mg/1ml
【抗體來源】：Rabbit or Mouse or Goat
【克隆類型】：polyclonal or monoclonal
【產(chǎn)品類型】：一抗
【產(chǎn)品應(yīng)用】：可以用于做石蠟切片免疫組化，冰凍切片免疫組化，Elisa，WB，免疫熒光、流式細(xì)胞術(shù)等實驗。
Anti-SYP p38抗體,突觸素抗體/突觸相關(guān)蛋白-1產(chǎn)品介紹：SYAP1 (synapse-associated protein 1) is a 352 amino acid protein that is ubiquitously expressed in adult tissues. SYAP1 contains one BSD domain which is a novel domain that is present in basal transcription factors, synapse-associated proteins and several hypothetical proteins. The BSD domain is characterized by three predicted alpha helices and by conserved tryptophan and phenylalanine residues, located at the C-terminus of the domain. The gene that encodes SYAP1 in humans is located on chromosome X. Chromosome X consists of about 153 million base pairs and nearly 1,000 genes. Color blindness, hemophilia, and Duchenne muscular dystrophy are well known X chromosome-linked conditions which affect males more frequently as males carry a single X chromosome.
英文別名：Synapse associated protein-1; synapse-associated protein 1-like; 2010110O17Rik, AW011796, DKFZp686K221, FLJ14495, FLJ44185, MGC94115, PRO3113, SYAP1; SYAP1_HUMAN; SAP-1.
Western可以參考如下步驟進(jìn)行操作：
1、收集蛋白樣品(Protein sample preparation)
可以使用適當(dāng)?shù)牧呀庖毫呀赓N壁細(xì)胞、懸浮細(xì)胞或組織樣品。對于某些特定的亞細(xì)胞組份蛋白，例如細(xì)胞核蛋白、細(xì)胞漿蛋白、線粒體蛋白等，可以參考相關(guān)文獻(xiàn)提取這些亞細(xì)胞組份蛋白，也可以使用試劑盒進(jìn)行抽提。
收集完蛋白樣品后，為確保每個蛋白樣品的上樣量*，需要測定每個蛋白樣品的蛋白濃度。根據(jù)所使用的裂解液的不同，需要采用適當(dāng)?shù)牡鞍诐舛葴y定方法。因為不同的蛋白濃度測定方法對于一些去垢劑和還原劑等的兼容性差別很大。
2、電泳(Electrophoresis)
（1）、SDS-PAGE凝膠配制
SDS-PAGE凝膠可以參考一些文獻(xiàn)資料進(jìn)行配制，也可以使用博研生物生產(chǎn)的SDS-PAGE凝膠配制試劑盒。該試劑盒提供了除水和配膠器具外的所有試劑以及配制各種濃度SDS-PAGE的配方。
（2）、樣品處理
在收集的蛋白樣品中加入適量濃縮的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液。例如2X或5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液。使用5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液可以減小上樣體積，在相同體積的上樣孔內(nèi)可以上樣更多的蛋白樣品。5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液可以參考相關(guān)文獻(xiàn)資料配制，也可以使用我公司生產(chǎn)的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(5X) 。100℃或沸水浴加熱3-5分鐘，以充分變性蛋白。
（3）、上樣與電泳
冷卻到室溫后，把蛋白樣品直接上樣到SDS-PAGE膠加樣孔內(nèi)即可。為了便于觀察電泳效果和轉(zhuǎn)膜效果，以及判斷蛋白分子量大小，使用預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)。
電泳時通常*在上層膠時使用低電壓恒壓電泳，而在溴酚藍(lán)進(jìn)入下層膠時使用高電壓恒壓電泳。對于Bio-Rad的標(biāo)準(zhǔn)電泳裝置或類似電泳裝置，低電壓可以設(shè)置在80-100V，高電壓可以設(shè)置在120V左右。SDS-PAGE可以采用普通的電泳儀就可以滿足要求。為了電泳方便起見，也可以采用整個SDS-PAGE過程恒壓的方式，通常把電壓設(shè)置在100V，然后設(shè)定定時時間為90－120分鐘。設(shè)置定時可以避免經(jīng)常發(fā)生的電泳過頭。
通常電泳時溴酚藍(lán)到達(dá)膠的底端處附近即可停止電泳，或者可以根據(jù)預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)的電泳情況，預(yù)計目的蛋白已經(jīng)被適當(dāng)分離后即可停止電泳。
3、轉(zhuǎn)膜(Transfer)
我們*在Western實驗中選用PVDF膜。硝酸纖維素膜(NC膜)或PVDF膜（二氟化樹脂膜膜孔徑：0.45um)也可以使用，但硝酸纖維素膜比較脆，在操作過程中特別是用鑷子夾取等過程中容易裂開。膜的使用請參考生產(chǎn)商的*使用步驟。
通常如果使用Bio-Rad的標(biāo)準(zhǔn)濕式轉(zhuǎn)膜裝置，可以設(shè)定轉(zhuǎn)膜電壓120V，轉(zhuǎn)膜時間為30-60分鐘。具體的轉(zhuǎn)膜時間要根據(jù)目的蛋白的大小而定，目的蛋白的分子量越大，需要的轉(zhuǎn)膜時間越長，目的蛋白的分子量越小，需要的轉(zhuǎn)膜時間越短。
在轉(zhuǎn)膜過程中，特別是高電流快速轉(zhuǎn)膜時，通常會有非常嚴(yán)重的發(fā)熱現(xiàn)象，把轉(zhuǎn)膜槽放置在冰浴中進(jìn)行轉(zhuǎn)膜。轉(zhuǎn)膜的效果可以觀察所使用的預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)，通常分子量zui大的1-2條帶較難全部轉(zhuǎn)到膜上。轉(zhuǎn)膜的效果也可以用麗春紅染色液對膜進(jìn)行染色，以觀察實際的轉(zhuǎn)膜效果。也可以用考馬斯亮藍(lán)快速染色液對完成轉(zhuǎn)膜的SDS-PAGE膠進(jìn)行染色，以觀察蛋白的殘留情況。
4、封閉(Blocking)
轉(zhuǎn)膜完畢后，立即把蛋白膜放置到預(yù)先準(zhǔn)備好的Western洗滌液中，漂洗1-2分鐘，以洗去膜上的轉(zhuǎn)膜液。從轉(zhuǎn)膜完畢后所有的步驟，一定要注意膜的保濕，避免膜的干燥，否則極易產(chǎn)生較高的背景。
用微型臺式真空泵吸盡洗滌液，加入Western封閉液，在搖床上緩慢搖動,室溫封閉60分鐘。對于一些背景較高的抗體，可以在4℃ 封閉過夜。
5、一抗孵育(Primary antibody incubation)
參考一抗的說明書，按照適當(dāng)比例用Western一抗稀釋液稀釋一抗。
用微型臺式真空泵吸盡封閉液，立即加入稀釋好的一抗，室溫或4℃在側(cè)擺搖床上緩慢搖動孵育一小時。如果一抗孵育一小時效果不佳，可以在4℃緩慢搖動孵育過夜?；厥找豢?。加入Western洗滌液，在側(cè)擺搖床上緩慢搖動洗滌5-10分鐘。吸盡洗滌液后，再加入洗滌液，洗滌5-10分鐘。共洗滌3次。如果結(jié)果背景較高可以適當(dāng)延長洗滌時間并增加洗滌次數(shù)。
6、二抗孵育(Secondary antibody inucubation)
參考二抗的說明書，按照適當(dāng)比例用Western二抗稀釋液稀釋辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的二抗。
用微型臺式真空泵吸盡洗滌液，立即加入稀釋好的二抗，室溫或4℃在側(cè)擺搖床上緩慢搖動孵育一小時?；厥斩?，加入Western洗滌液，在側(cè)擺搖床上緩慢搖動洗滌5-10分鐘。吸盡洗滌液后，再加入洗滌液，洗滌5-10分鐘。共洗滌3次。如果結(jié)果背景較高可以適當(dāng)延長洗滌時間并增加洗滌次數(shù)。
7、蛋白檢測(Detection of proteins)
參考相關(guān)說明書，使用BeyoECL, Western 熒光檢測試劑等ECL類試劑來檢測蛋白。
洗片時可以使用X光片自動洗片機。如果沒有自動洗片機，可以用顯影定影試劑盒自行配制顯影液和定影液進(jìn)行手工洗片。
8、膜的重復(fù)利用(Membrane recovery)
如果蛋白樣品非常寶貴，可以使用Western一抗二抗去除液處理蛋白膜，以重復(fù)利用蛋白膜。
相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品：
PPAR-delta (peroxisome proliferator-activated receptor;PPAR-beta) D型-過氧化酶活化增生受體抗體
PPARγ (peroxisome proliferator-activated receptor-gamma) 過氧化酶活化增生受體γ抗體
PKB/Akt1 蛋白激酶B（兔來源抗體）
phospho-PKB（pSer473）(p-AKT PKB) 抗磷酸化蛋白激酶B抗體（*磷酸化位點：473）
PKN2 (protein kinase N2) 蛋白激酶N2抗體
RKIP(Raf kinase inhibitor protein) Raf激酶抑制蛋白抗體
PKR(double-stranded RNA-dependent Protein Kinase) 蛋白激酶R/雙鏈RNA依賴蛋白激酶抗體
AKT2 蛋白激酶B2
RBC(Human RBC) mouse monoclonal 紅細(xì)胞單抗
PR（Progestogerone receptor） 孕激素受體抗體
pre-X protein（NT）[Hepatitis B virus N-Terminus] 抗乙肝病毒pre-X蛋白抗體（N端）
Profilin 1 前纖維蛋白1抗體
pre-X protein（CT）[Hepatitis B virus C-Terminus] 抗乙肝病毒pre-X蛋白抗體（C端）
Profilin 2 前纖維蛋白2抗體
Recomb Protein G 抗重組蛋白G抗體
Recomb Protein A 抗重組蛋白A抗體
RAM-11 RAM-11抗體
RAMP-1 受體活性修飾蛋白1抗體
PRMT1(protein arginine metYMltransferase 1) 蛋白質(zhì)*甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體
PRCP(prolylcarboxypeptidase) 脯氨酰羧肽酶抗體
PRDX3(peroxiredoxin 3) 過氧化還原酶3抗體
RRM1(ribonucleotide reductase R1 mRNA) 抗核糖核苷酸還原酶1抗體
PRL (Prolactin) 鼠抗泌乳素抗體
PRL-2（Protein tyrosine phosphatase type IV A protein 2） 肝再生磷酸酯酶2抗體
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