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上海研盟生物科技有限公司
“Anti-R Cadherin抗體,R Cadherin抗體"抗體規格0.1ml、0.2ml、1ml,抗體產品有效期一年,質保三個月,質保期內出現任何質量問題或是出不了實驗結果均可免費退換。:、
Anti-R Cadherin抗體,R Cadherin抗體上海研盟生物科技有限公司*,主要應用于WB、IHC、IF、ELISA、流式細胞術等實驗中。說明書隨貨發送,您也可以直接我司在線客服索取。:
【中文名稱】:R Cadherin抗體
【英文名稱】:Anti-R Cadherin抗體
【產品編號】:BYK-11196R
【規 格】:0.1ml/0.2ml
【相關標記】:Alexa Fluor 350、Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 555、Alexa Fluor 647、AP、APC、Biotin、Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7、FITC、Gold、HRP、PE、PE-Cy3、PE-CY5、PE-CY5.5、PE-CY7、RBITC.
【濃 度】:1mg/1ml
【抗體來源】:Rabbit or Mouse or Goat
【克隆類型】:polyclonal or monoclonal
【產品類型】:一抗
【產品應用】:可以用于做石蠟切片免疫組化,冰凍切片免疫組化,Elisa,WB,免疫熒光、流式細胞術等實驗。
【英文別名】:CADH4_HUMAN; Cadherin 4; Cadherin4; Cadherin-4; CDH 4; CDH-4; R CAD; R-CAD; R-cadherin; Retinal Cadherin.
【抗體修復方式】:修復液:0.01M 枸櫞酸(pH6.0)或者0.05M EDTA(pH8.0)
Anti-R Cadherin抗體,R Cadherin抗體產品介紹:The cadherins are a family of Ca++-dependent adhesion molecules that function to mediate cell-cell binding critical to the maintenance of tissue structure and morphogenesis. Cadherins each contain a large extracellular domain at the amino terminus, which is characterized by a series of five homologous repeats, the most distal of which is thought to be responsible for binding specificity. The relatively short carboxy terminal, intracellular domain interacts with a variety of cytoplasmic proteins, including catenin b, to regulate cadherin function. R-cadherin (for retinal-cadherin, also designated cadherin-4), which was first identified in the retina of chicken, has been shown to be involved in the development of striated muscle and potentially epithelia in addition to its involvement in retinal development.
一.合適的抗體稀釋度
抗體的濃度是免疫染色的關鍵,如果抗體濃度過高,抗體分子過多于抗原決定簇,可導致抗體結合減少,產生陰性結果。此陰性結果并不一定是缺少抗原,而是由于抗體過量,這種現象類似于凝集反應中的前帶效應(prozone effect)。因此,必須使用一系列稀釋做“棋盤式效價滴定”,檢測抗體的合適稀釋度,以得到zui大強度的特異性染色和zui弱的背景染色。抗體稀釋度應根據:1.抗體效價高,溶液中特異性抗體濃度越高,工作稀釋度越高;2.一般講,應用的抗體稀釋度越大,溫育時間越長;3.對于抗體與非特異性蛋白的結合,只有高稀釋度時才能防止其非特異性背景染色;4.稀釋用緩沖液的種類,標本的固定和處理過程等也可影響稀釋度,所以合適的稀釋度應根據具體情況測定。抗體的稀釋主要是指*抗體,因為*抗體中特異性抗體合適的濃度是關鍵,應用高稀釋度*抗體僅高親和力的特異性染色反應,減少或消除其中交叉抗體反應。
二.血清封閉,減少非特異性結合
組織中非抗原抗體反應出現的陽性染色稱為非特異性背景染色,zui常見的原因是蛋白吸附于高電荷的膠原和結締組織成分上。zui有效方法是在用*抗體前加與制備第二抗體相同動物的非免疫血清(1:5-1:20),封閉組織上帶電荷基團而除去與一抗非特異性結合。必要時加入2%-5%牛血清白蛋白,可進一步減少非特異性染色,作用時間為10-20min。免疫熒光染色時,可用0.01%伊文藍(PBS溶液)稀釋熒光抗體,對消除背景的非特異性熒光染色有很好的效果。洗滌用的緩沖液中加入0.85%-1%NaCl成為高鹽溶液,充分洗滌切片,能有效的減少非特異性結合而減少背景染色。
三.設置對照
其目的在于證明和肯定陽性結果的特異性,排除非特異性疑問。主要是針對*抗體對照,常用的對照方法包括:1. 陽性對照;2. 陰性對照;3. 阻斷實驗; 4.替代對照;5. 空白對照;6. 自身對照;7. 吸收實驗.
1. 陽性對照用已知抗原陽性的切片作對照與待檢標本同時進行免疫組織化學染色,對照切片應呈陽性結果,成為陽性對照。證明全過程均符合要求,尤其當待檢標本呈現陰性結果時,陽性對照尤為重要。2.陰性對照用確證不含已知抗原的標本作對照,應呈陰性結果,成為陰性對照,是陰性對照的一種。其實空白、替代、吸收和抑制都屬于陰性對照。當待檢標本呈陽性結果時,陰性對照就更加重要,用以排除假陽性。
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