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Anti-phospho-PAK3抗體,磷酸化p21激活激酶3抗體

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產(chǎn)品簡介

“Anti-phospho-PAK3抗體,磷酸化p21激活激酶3抗體"抗體規(guī)格0.1ml、0.2ml、1ml，抗體產(chǎn)品有效期一年，質(zhì)保三個月，質(zhì)保期內(nèi)出現(xiàn)任何質(zhì)量問題或是出不了實驗結(jié)果均可免費退換。：、

詳細介紹

Anti-phospho-PAK3抗體,磷酸化p21激活激酶3抗體上海研盟生物科技有限公司*，主要應(yīng)用于WB、IHC、IF、ELISA、流式細胞術(shù)等實驗中。說明書隨貨發(fā)送，您也可以直接我司在線客服索取。：

【中文名稱】：磷酸化p21激活激酶3抗體

【英文名稱】：Anti-phospho-PAK3抗體

【產(chǎn)品編號】：BYK-1655R
【規(guī) 格】：0.1ml/0.2ml
【相關(guān)標記】：Alexa Fluor 350、Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 555、Alexa Fluor 647、AP、APC、Biotin、Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7、FITC、Gold、HRP、PE、PE-Cy3、PE-CY5、PE-CY5.5、PE-CY7、RBITC.
【濃度】：1mg/1ml
【抗體來源】：Rabbit or Mouse or Goat
【克隆類型】：polyclonal or monoclonal
【產(chǎn)品類型】：一抗
【產(chǎn)品應(yīng)用】：可以用于做石蠟切片免疫組化，冰凍切片免疫組化，Elisa，WB，免疫熒光、流式細胞術(shù)等實驗。

【英文別名】：PAK3_HUMAN; Beta PAK; bPAK; CDKN1A; hPAK3; Mental retardation X linked 30; MRX30; MRX47; Oligophrenin 3; OPHN3; p21 activated kinase 3; p21 CDKN1A activated kinase 3; PAK-3; PAK3 p21 protein (Cdc42/Rac)-activated kinase 3; PAK3beta; Pak65alpha; Pak65beta; Serine threonine protein kinase PAK 3; Stk4.

【抗體修復(fù)方式】：修復(fù)液：0.01M 枸櫞酸（pH6.0）或者0.05M EDTA（pH8.0）

Anti-phospho-PAK3抗體,磷酸化p21激活激酶3抗體產(chǎn)品介紹：The p21 activated kinases (PAK) are critical effectors that link Rho GTPases to cytoskeleton reorganization and nuclear signaling. The PAK proteins are a family of serine/threonine kinases that serve as targets for the small GTP binding proteins, CDC42 and RAC1, and have been implicated in a wide range of biological activities. The protein encoded by this gene is activated by proteolytic cleavage during caspase-mediated apoptosis, and may play a role in regulating the apoptotic events in the dying cell.
P21-activated kinase (PAK) is actually a family of serine/threonine protein kinases, members of which are activated by small molecular weight GTPases. The three most common isoforms are PAK 1, PAK 2, and PAK 3 (also known as alpha PAK, gamma PAK, and beta PAK, respectively). These kinases contain numerous regulatory elements that trigger diverse signaling processes such as those initiated by activated GTPases, interaction with Src homology 3 (SH3) domains, and caspase mediated proteolytic cleavage. Autophosphorylation of serine 141 (serine 144 for PAK 1 and serine 139 PAK 3), catalyzed by Cdc42, is required for activation of PAK.

一.合適的抗體稀釋度
抗體的濃度是免疫染色的關(guān)鍵，如果抗體濃度過高，抗體分子過多于抗原決定簇，可導(dǎo)致抗體結(jié)合減少，產(chǎn)生陰性結(jié)果。此陰性結(jié)果并不一定是缺少抗原，而是由于抗體過量，這種現(xiàn)象類似于凝集反應(yīng)中的前帶效應(yīng)（prozone effect）。因此，必須使用一系列稀釋做“棋盤式效價滴定”，檢測抗體的合適稀釋度，以得到zui大強度的特異性染色和zui弱的背景染色。抗體稀釋度應(yīng)根據(jù)：1.抗體效價高，溶液中特異性抗體濃度越高，工作稀釋度越高；2.一般講，應(yīng)用的抗體稀釋度越大，溫育時間越長；3.對于抗體與非特異性蛋白的結(jié)合，只有高稀釋度時才能防止其非特異性背景染色；4.稀釋用緩沖液的種類，標本的固定和處理過程等也可影響稀釋度，所以合適的稀釋度應(yīng)根據(jù)具體情況測定。抗體的稀釋主要是指*抗體，因為*抗體中特異性抗體合適的濃度是關(guān)鍵，應(yīng)用高稀釋度*抗體僅高親和力的特異性染色反應(yīng)，減少或消除其中交叉抗體反應(yīng)。
二.血清封閉，減少非特異性結(jié)合
組織中非抗原抗體反應(yīng)出現(xiàn)的陽性染色稱為非特異性背景染色，zui常見的原因是蛋白吸附于高電荷的膠原和結(jié)締組織成分上。zui有效方法是在用*抗體前加與制備第二抗體相同動物的非免疫血清（1:5-1:20），封閉組織上帶電荷基團而除去與一抗非特異性結(jié)合。必要時加入2%-5%牛血清白蛋白，可進一步減少非特異性染色，作用時間為10-20min。免疫熒光染色時，可用0.01%伊文藍（PBS溶液）稀釋熒光抗體，對消除背景的非特異性熒光染色有很好的效果。洗滌用的緩沖液中加入0.85%-1%NaCl成為高鹽溶液，充分洗滌切片，能有效的減少非特異性結(jié)合而減少背景染色。

三.設(shè)置對照
其目的在于證明和肯定陽性結(jié)果的特異性，排除非特異性疑問。主要是針對*抗體對照，常用的對照方法包括：1. 陽性對照；2. 陰性對照；3. 阻斷實驗； 4.替代對照；5. 空白對照；6. 自身對照；7. 吸收實驗.
1. 陽性對照用已知抗原陽性的切片作對照與待檢標本同時進行免疫組織化學(xué)染色，對照切片應(yīng)呈陽性結(jié)果，成為陽性對照。證明全過程均符合要求，尤其當(dāng)待檢標本呈現(xiàn)陰性結(jié)果時，陽性對照尤為重要。2.陰性對照用確證不含已知抗原的標本作對照，應(yīng)呈陰性結(jié)果，成為陰性對照，是陰性對照的一種。其實空白、替代、吸收和抑制都屬于陰性對照。當(dāng)待檢標本呈陽性結(jié)果時，陰性對照就更加重要，用以排除假陽性。

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