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上海研盟生物科技有限公司
“Anti-Oct-3抗體,胚胎干細胞關鍵蛋白抗體"抗體規格0.1ml、0.2ml、1ml,抗體產品有效期一年,質保三個月,質保期內出現任何質量問題或是出不了實驗結果均可免費退換。:、
上海研盟生物科技有限公司Anti-Oct-3抗體,胚胎干細胞關鍵蛋白抗體現貨產品、*,歡迎廣大客戶前來咨詢公司客服了解更多有關本產品的信息!(科研用產品,非臨床及診斷)我公司將誠竭為您服務,期待您的來電。:
中文名稱:胚胎干細胞關鍵蛋白抗體
英文名稱:Anti-Oct-3/Oct-4抗體
產品編號:BYK-1111R
別名:POU domain, class 5, transcription factor 1;Oct-3/4; Oct-4A; Oct4A; Oct 4A; Octamer-binding transcription factor 3; Octamer-4; Octamer-3; Oct-3; NF-A3; Otf-3; Otf3; MGC22487; Oct 3; Oct 4; OCT3; Oct4; Octamer binding protein 3; Octamer binding protein 4; Octamer binding transcription factor 3; Octamer-binding protein 3; Octamer-binding protein 4; OTF 3; OTF 4; OTF-3; OTF3; OTF4; PO5F1_HUMAN; POU class 5 homeobox 1; POU domain class 5 transcription factor 1; POU domain transcription factor OCT4; POU type homeodomain containing DNA binding protein; POU5F1; POU5F1.
產品規格:0.1ml、0.2ml、1ml
產品用途:科研實驗
產品價格:請報價
說明書:請添加客服直接索取
抗體來源:本公司抗體有兔來源和鼠來源等
克隆類型:兔來源為多抗,鼠來源為單抗
產品類型:一抗
保存條件:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
避免反復凍融,保質期一年。
Anti-Oct-3抗體,胚胎干細胞關鍵蛋白抗體產品介紹:Expression of the POU-domain transcription factor Octamer-4 (Oct-4) is widely regarded as a hallmark of pluripotent stem cells. The relationship of Oct-4 to pluripotent stem cells is indicated by its tightly restricted expression to undifferentiated pluripotent stem cells. Upon differentiation to somatic lineages, the expression of Oct-4 disappears rapidly. Unlike the majority of pluripotent stem cell markers, the biological role of Oct-4 has been well characterized. Studies performed in mice point to the critical role of Oct-4 in the establishment and/or maintenance of pluripotent stem cells in an uncommitted state.
Western-blotting試驗方法:
蛋白提樣品制備
1、 將培養液吸入至15 ml離心管中,于2500 rpm離心5 min。
2、 棄上清,加入5 ml PBS并用槍輕輕吹打洗滌,然后2500 rpm離心5 min。棄上清后用PBS重復洗滌一次。
3、 用槍吸干上清后,加100 μl裂解液(含PMSF)冰上裂解30 min,裂解過程中要經常彈一彈以使細胞充分裂解。
4、將裂解液4℃、12000 rpm離心5 min,取上清分裝于0.5 ml EP管中并置于-20℃保存。
5、BCA法測蛋白濃度
SDS-PAGE電泳
1、 玻璃板對齊后放入夾中卡緊,然后垂直卡在架子上準備灌膠。
2、按前面方法配10%分離膠,加入TEMED后立即搖勻即可灌膠。灌膠時,可用10 ml槍吸取5 ml膠沿玻璃放出,待膠面升到綠帶中間線高度時即可。然后膠上加一層水,液封后的膠凝的更快。(灌膠時開始可快一些,膠面快到所需高度時要放慢速度。操作時膠一定要沿玻璃板流下,這樣膠中才不會有氣泡。加水液封時要慢,否則膠會被沖變型。)
3、 當水和膠之間有一條折射線時,說明膠已凝了。再等3 min使膠充分凝固就可倒去膠上層水并用吸水紙將水吸干。
4、 按方法配4%的濃縮膠,加入TEMED后立即搖勻即可灌膠。將剩余空間灌滿濃縮膠后將梳子插入孔槽。灌膠時也要使膠沿玻璃板流下以免膠中有氣泡產生。插梳子時要使梳子保持水平。待到濃縮膠凝固后,兩手分別捏住梳子的兩邊豎直向上輕輕將其拔出。
5、 用水沖洗濃縮膠,將其放入電泳槽中。
6、 測完蛋白含量后,計算含20-50 μg蛋白(根據自己的實驗需要進行選擇,沒有固定的量)的溶液體積即為上樣量。取出上樣樣品至200 μl的EP管中,加入5×SDS 上樣緩沖液至終濃度為1×。上樣前要將樣品于沸水中煮5-10 min使蛋白變性。
7、 加入足夠的電泳緩沖液后開始準備上樣。(電泳液至少要漫過內測的小玻璃板。)用微量進樣器貼壁吸取樣品,將樣品吸出不要吸進氣泡。將加樣器針頭插至加樣孔中緩慢加入樣品(包括一孔做可視的蛋白marker)。(加樣太快可使樣品沖出加樣孔,若有氣泡也可能使樣品溢出。加入下一個樣品時,進樣器需在外槽電泳緩沖液中洗滌數次,以免交叉污染)
8、電泳:濃縮膠時用80-100 V跑,到分離膠以后用150-200 V跑,總時間2 h左右,電泳至溴酚蘭剛跑出即可終止電泳,進行轉膜。
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