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上海研盟生物科技有限公司
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“Anti-NF-H抗體,高分子量神經絲蛋白抗體"抗體規格0.1ml、0.2ml、1ml，抗體產品有效期一年，質保三個月，質保期內出現任何質量問題或是出不了實驗結果均可免費退換。：、
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【中文名稱】：高分子量神經絲蛋白抗體
【英文名稱】：Anti-NF-H/Neurofilament H/Neurofilament 200/NF200抗體
【產品編號】：BYK-0708R
【英文別名】：Neurofilament 200; 200 kDa neurofilament protein; 200 kD Neurofilament Heavy; NEFH; NEFH; NF200; NF-200; Neurofilament H; Neurofilament heavy polypeptide 200kD; Neurofilament heavy polypeptide 200kDa; Neurofilament heavy polypeptide; Neurofilament triplet H protein; Neurofilament triplet H protein; Hypophosphorylated Neurofilament H; NF H; NFH; NFH_HUMAN; KIAA0845.
【規 格】：0.1ml、0.2ml、1ml
【相關標記】：Alexa Fluor 350、Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 555、Alexa Fluor 647、AP、APC、Biotin、Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7、FITC、Gold、HRP、PE、PE-Cy3、PE-CY5、PE-CY5.5、PE-CY7、RBITC.
【濃 度】：1mg/1ml
【抗體來源】：Rabbit or Mouse or Goat
【克隆類型】：polyclonal or monoclonal
【產品類型】：一抗
【產品應用】：可以用于做石蠟切片免疫組化，冰凍切片免疫組化，Elisa，WB，免疫熒光、流式細胞術等實驗。
【抗體修復方式】:修復液：0.01M 枸櫞酸（pH6.0）或者0.05M EDTA（pH8.0）
【產品介紹】：Neurofilaments can be defined as the intermediate or 10nm filaments found in specifically in neuronal cells. When visualised using an electron microscope, neurofilaments appear as 10nm diameter fibres of indeterminate length that generally have fine wispy protrusions from their sides. They are particularly abundant in axons of large projection neurons. They probably function to provide structural support for neurons and their synapses and to support the large axon diameters required for rapid conduction of impulses down axons. Neurofilaments are composed of a mixture of subunits, which usually includes the three neurofilament triplet proteins neurofilament light (NFL), neurofilament medium (NFM) and neurofilament heavy (NFH). Neurofilaments may also include smaller amounts of peripherin, alpha internexin, nestin and in some cases vimentin. Antibodies to the various neurofilament subunits are very useful cell type markers since the proteins are among the most abundant of the nervous system, are expressed only in neurons, and are biochemically very stable. Some studies have shown that levels of neurofilament heavy and neurofilament light are elevated in patients with Alzheimer's disease, frontotemporal lobe dementia, and vascular dementia.
Anti-NF-H抗體,高分子量神經絲蛋白抗體Western-blotting試驗方法：
蛋白提樣品制備
1、 將培養液吸入至15 ml離心管中，于2500 rpm離心5 min。
2、 棄上清，加入5 ml PBS并用槍輕輕吹打洗滌，然后2500 rpm離心5 min。棄上清后用PBS重復洗滌一次。
3、 用槍吸干上清后，加100 μl裂解液（含PMSF）冰上裂解30 min，裂解過程中要經常彈一彈以使細胞充分裂解。
4、將裂解液4℃、12000 rpm離心5 min，取上清分裝于0.5 ml EP管中并置于-20℃保存。
5、BCA法測蛋白濃度
SDS－PAGE電泳
1、 玻璃板對齊后放入夾中卡緊，然后垂直卡在架子上準備灌膠。
2、按前面方法配10％分離膠，加入TEMED后立即搖勻即可灌膠。灌膠時，可用10 ml槍吸取5 ml膠沿玻璃放出，待膠面升到綠帶中間線高度時即可。然后膠上加一層水，液封后的膠凝的更快。（灌膠時開始可快一些，膠面快到所需高度時要放慢速度。操作時膠一定要沿玻璃板流下，這樣膠中才不會有氣泡。加水液封時要慢，否則膠會被沖變型。）
3、 當水和膠之間有一條折射線時，說明膠已凝了。再等3 min使膠充分凝固就可倒去膠上層水并用吸水紙將水吸干。
4、 按方法配4％的濃縮膠,加入TEMED后立即搖勻即可灌膠。將剩余空間灌滿濃縮膠后將梳子插入孔槽。灌膠時也要使膠沿玻璃板流下以免膠中有氣泡產生。插梳子時要使梳子保持水平。待到濃縮膠凝固后，兩手分別捏住梳子的兩邊豎直向上輕輕將其拔出。
5、 用水沖洗濃縮膠，將其放入電泳槽中。
6、 測完蛋白含量后，計算含20-50 μg蛋白（根據自己的實驗需要進行選擇，沒有固定的量）的溶液體積即為上樣量。取出上樣樣品至200 μl的EP管中，加入5×SDS 上樣緩沖液至終濃度為1×。上樣前要將樣品于沸水中煮5-10 min使蛋白變性。
7、 加入足夠的電泳緩沖液后開始準備上樣。（電泳液至少要漫過內測的小玻璃板。）用微量進樣器貼壁吸取樣品，將樣品吸出不要吸進氣泡。將加樣器針頭插至加樣孔中緩慢加入樣品（包括一孔做可視的蛋白marker）。（加樣太快可使樣品沖出加樣孔，若有氣泡也可能使樣品溢出。加入下一個樣品時，進樣器需在外槽電泳緩沖液中洗滌數次，以免交叉污染）
8、電泳：濃縮膠時用80-100 V跑，到分離膠以后用150-200 V跑，總時間2 h左右，電泳至溴酚蘭剛跑出即可終止電泳，進行轉膜。
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