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大鼠15-deoxy-前列腺素15d-PGJ2ELISA試劑盒
大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白2elisa試劑盒操作程序:
1.將試劑盒從冷藏環境中取出并將所需試劑從試劑盒取出,置室溫(20-25 ℃)平衡30 min以上, 注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
2.按需要取出微孔條及板架,將不用的微孔板重新密封,保存于2-8 ℃,不要冷凍。
3.加標準品/樣本50 μL /孔,然后加入抗體工作液50 μL /孔,再振蕩混勻,用封板膜蓋板,37 ℃反應30 min。
4.洗板4-5次,每次浸泡30秒,拍干。
5.加入酶標記物100 μL /孔,用封板膜蓋板,37 ℃反應20 min。
6.洗板4-5次,每次浸泡30 s,拍干。
7.顯色:每孔加入底物緩沖液50 μL,再加底物液50 μL,輕輕振蕩混勻,37 ℃環境避光顯色10 min。
8.測定:每孔加入終止液50 μL,輕輕振蕩勻,設定酶標儀于450 nm處(在20 min內讀完數據),測定吸光度值。
大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白2elisa試劑盒檢測結果準確可靠的必要條件:
1. 加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。
2. 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。
3. 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4. 合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。
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