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大鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒

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所  在  地鹽城市

更新時間:2017-03-15 10:40:57瀏覽次數:319次

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大鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒 ----公司專業供應,江蘇科晶生物*經營各種類ELISA試劑盒及抗體、生化試劑、耗材等生物試劑產品。秉承“高品質、低價格、快發貨“的服務理念,誠信經營,價格實惠,服務周到,質量有保證。歡迎新老客戶!

產品名稱:大鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒 
樣本:血清、血漿及相關液體樣本
標記物:免費代測
應用: 酶聯免疫分析
檢測方法:雙抗夾心法
檢測限:見說明書
供應商:江蘇科晶生物科技有限公司
數量:現貨
規格:96T/48T

【實驗準備】:
1. ELISA試劑盒及待測樣本
2. 酶標儀(450nm波長濾光片) 
3. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭
4. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水 
5. 吸水紙
 
大鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒 【標本要求】:
1. 血清: 
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。 
2. 血漿: 
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成應再次離心。 
3. 尿液: 
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。 
4. 細胞培養上清: 
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。 
5. 培養細胞: 
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。 
6. 組織標本: 
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。 
7.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融 
8.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。 

大鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒 【操作步驟】:
標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,依次進行稀釋數倍。
加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
配液:將30倍(48T 的20 倍)濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 
溫育:操作同3。
洗滌:操作同5。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

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