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技術文章

液相色譜日常簡易保養及維護及選購指南

閱讀:15          發布時間:2025-1-10
1、流動相的抽作要求:    液相級色譜醇,二次蒸餾水,緩沖鹽一定要過濾;    流動相脫氣至關重要(可采用抽濾,超聲波脫氣等方法)    2、吸濾頭:    特殊情況下可拆下濾頭抽取以判斷其中是否堵塞;亦可用注射器吸取流動相通過吸濾頭打出以判斷其是否堵塞。若有堵塞情況可用異丙醇超聲波清洗;清洗不成功則需要更換。    3、單向閥:    如遇到泵壓不穩或流動相不能抽取,則可能是單向閥出現問題,卸下用異丙醇超聲波清洗,清洗時須按其安裝的方向放置在小燒杯中,切記不可與安裝方向倒置超洗!    4、泵頭:    泵頭漏液或出現其它故障一般要申請維修(如漏液,或更換柱塞桿及其密封墊等)    5、過濾器:    當色譜峰出現異常情況時,有可能是此部件被污染,拆下用異丙醇超洗或更換過濾墊片。    6、排液閥:    此處不能密封或漏液時一般是其中的墊片污染或磨損,可卸下后取出其墊片用異丙醇超聲波清洗或更換墊圈。    7、手動進樣器:    平時應注意用二次蒸餾水和甲醇在裝載狀態及進樣分析狀態清洗;如出現漏液現象,原因極可能為轉子密封墊磨損或污染,一般須申請維修或更換配件。    8、流通池:    在色譜峰不正常時會可能是此部件補污染。可拆卸后取出其中的墊片用異丙醇超洗(可根據說明書進行操作或申請維修)。    9、工作站:    出現死機可重起計算機;不正常運行時,首先可更換電腦測試其硬件故障;或在本機上重新插拔接口、重新安裝軟件。 關于液相色譜柱的選擇

液相色譜柱,是一種用于液體色譜分析儀器的部件。那么我們該如何的去選擇液相色譜柱呢?

下面我們就一起來看看吧。

在選擇色譜柱之前,先多了解自己的樣品和雜質,他們的類型結構、極性、酸堿性、分子量大小等等,液相色譜柱決定最終分離效果,所以在選擇色譜柱時候有必要考慮清楚自己的需求。

首先液相色譜柱目前來說分為正反相色譜柱,正相有SI等,反相有C18等。正相主要分離極性物質,反相主要分離非極性物質,氨基柱等主要分離二者之間的。

液相色譜日常簡易保養及維護及選購指南(圖1)

明確了色譜柱大概功能之后,確認下自己樣品信息,基本就有點眉目了,方向對了,剩下的事情就是細節了如:鍵合相、粒徑、孔徑、碳載量等

1.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在99%酸性水溶液條件下檢測,即要選擇承受99%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱

2.如果樣品極性太強,或酸性太強;可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,HILIC(親水色譜),也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱(缺點是離子對試劑平衡時間長;

對流動相pH要求比較精密,否則很難重復實驗,另外離子對試劑很難洗下來,基本上用了離子對的色譜柱就不能再用于其它實驗)

3.若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質,且硅膠端基封尾)或一些經過修飾的C18柱(如極性嵌入技術或堿去活技術等);

他們都會減少堿性化合物的拖尾,一般會選擇中性或偏堿的條件下做,因為這樣可增加堿性樣品的保留

4.如果堿性化合物的極性太強,或堿性太強;可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(優點是方法開發簡單;

缺點是目前實現這一技術的色譜柱品牌比較少,價格也高)或者選用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用;

這也是很經典的檢測堿性樣品的方法)選擇強離子交換柱(缺點是不能用來分析其它樣品,對流動相pH要求比較精密,否則很難重復實驗)也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱。


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