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閱讀：1742發(fā)布時間：2017-4-20
單抗還是多抗？多肽還是重組蛋白？
我們收到這樣一個定制抗體的訂單詢問，我要定制一個針對小鼠Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein (MOG)某一段序列的抗體，這段序列包含35-55位氨基酸，那么我是需要單克隆抗體好還是多克隆抗體好？制備抗體的時候是用多肽作為免疫原好還是用重組蛋白作為免疫原好呢？
首先，我們來看看單克隆抗體和多克隆抗體的主要區(qū)別在哪里呢？單克隆抗體是針對單一抗原決定簇，來自單個B淋巴細(xì)胞克隆的抗體，多克隆抗體是針對多個抗原決定簇，由多個B淋巴細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的抗體。通常來說一個含有多個抗原決定簇的大分子免疫原進(jìn)入機(jī)體后，其不同的抗原決定簇會和帶有不同BCR的B細(xì)胞進(jìn)行結(jié)合，進(jìn)而使這些B細(xì)胞分化成為多種漿細(xì)胞，分泌針對不同抗原決定簇的抗體。這些抗體的集合體就是多抗，而需要得到針對單一抗原決定簇的單抗時，就需要對分泌抗體的B淋巴細(xì)胞（實(shí)際操作過程中是對融合細(xì)胞）進(jìn)行篩選，并進(jìn)行單克隆化了。
接下來我們看看實(shí)驗(yàn)需求：獲得針對35-55位氨基酸的抗體，這個小片段僅包括了21個氨基酸，依據(jù)抗原決定簇的大小，該片段內(nèi)應(yīng)該僅含有1-2個抗原決定簇，那么由此可以發(fā)現(xiàn)客戶對于抗體特異性的要求是十分高的，鑒于此，我們建議客戶制備單克隆抗體，這樣在有限稀釋單克隆篩選的過程中就可以直接篩選得到分泌針對目的片段抗體的單克隆株，從而保證特異性。
確定制備何種抗體后，我們就需要確定該用什么免疫原了。小鼠MOG蛋白是一個含有246個氨基酸的跨膜蛋白，僅從蛋白大小來分析，其至少還有10-20個抗原決定簇。姑且不論跨膜蛋白不易表達(dá)，即使我們能表達(dá)出全長的蛋白，如果我們用該蛋白作為免疫原免疫動物制備抗體，再從針對不同的抗原決定簇的抗體中篩選出僅針對35-55位氨基酸的抗體，那么特異性抗體篩選的工作量和實(shí)驗(yàn)用時無疑是很大的，鑒于此，可以考慮直接用多肽進(jìn)行載體偶聯(lián)后作為免疫原來制備抗體。
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