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江蘇菲亞生物科技有限公司
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抗血清的制備
2017-10-16 閱讀(1387)
抗血清指含有抗體的血清。傳統(tǒng)的抗血清制備方法是將某種抗原通過多次注入動(dòng)物，數(shù)十天后或數(shù)月后，采集動(dòng)物血，立即分離出血清。此抗血清在保存或應(yīng)用前必須作效價(jià)和特異性鑒定及純化。
（一）免疫動(dòng)物的選擇
免疫動(dòng)物的選擇基本要求：
1.抗原與免疫動(dòng)物的種屬差異越遠(yuǎn)越好。
2.動(dòng)物必須適齡、健壯、無感染、體重合乎要求。
3.不同動(dòng)物對(duì)同一免疫原有不同的免疫應(yīng)答表現(xiàn)。因此針對(duì)不同性質(zhì)的免疫原，選用相應(yīng)的動(dòng)物。蛋白質(zhì)抗原大部分動(dòng)物皆適合；甾類激素多用家免；酶類多用豚鼠。
4.抗血清要求：為R（rabbit）型或H（horse）型血清。R型抗血清是以家兔為代表的小型動(dòng)物產(chǎn)生的抗血清，能和很小量抗原結(jié)合形成沉淀線，而H型抗血清則以馬為代表的大型動(dòng)物產(chǎn)生的抗血清，較少用于沉淀反應(yīng)。
此外需要制備大量免疫血清時(shí)，應(yīng)選用馬、綿羊等大動(dòng)物；若需要量不多，則選用家兔、豚鼠和雞等小動(dòng)物。
（二）免疫方法及途徑
1.免疫原的注射劑量：應(yīng)考慮抗原性強(qiáng)弱、分子量大小、動(dòng)物的個(gè)體狀態(tài)和免疫時(shí)間。抗體需要量多，時(shí)間間隔長(zhǎng)，劑量可適當(dāng)加大。
2.免疫途徑：通常有靜脈、腹腔、肌肉、皮內(nèi)、皮下、淋巴結(jié)及足掌等。若抗原寶貴可采用淋巴結(jié)內(nèi)微量注射法；半抗原宜皮內(nèi)多點(diǎn)注射。
3.免疫方案：根據(jù)設(shè)計(jì)的目的要求、抗原性質(zhì)、佐劑的種類來制定免疫方案。可采用全量免疫法、微量免疫法或混合免疫法。
4.抗體產(chǎn)生階段：可分靜止期（約2天，血中尚無抗體）；指數(shù)期（約4天左右，抗體迅速上升）；穩(wěn)定期（約2～4周，抗體保持一個(gè)穩(wěn)定水平）；下降期（約幾個(gè)月后，此時(shí)抗體緩慢下降）四個(gè)階段。
