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試驗所需自備物品:

1. 酶標儀(450nm波長濾光片)

2. 高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL

3. 37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水

4. 吸水紙 

產品性狀：盒裝液體。

產品特點：靈敏性高，高效性，吸附均勻，吸附性好，回收利用率高，人ESF試劑盒是一款可以讓您放心選購的ELISA試劑盒產品。

使用范圍：此產品供科研實驗使用，不得用于臨床。

產品用途：人紅細胞刺激因子試劑盒用于測定人血清、血漿、組織及相關液體樣本中的含量或活性。

檢測試劑盒說明書種屬：人大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨ELISA試劑盒等種屬。

產品保存：2~8℃

有效期6個月。

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操作步驟: 實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫；試劑或樣品配制時，均需充分混勻，并盡量避免起泡。

1. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加標準品&樣品稀釋液 100μL，余孔分 別加標準品或待測樣品 100μL，注意不要有氣泡，加樣時將樣品加于酶標板底部，盡量不觸 及孔壁，輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜，37℃孵育 90 分鐘。為保證實驗結果有效性，每次 實驗請使用新的標準品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每個孔中加入*化抗體工作液 100μL（在使用前 15 分鐘 內配制），酶標板加上覆膜，37℃溫育 1 小時。

3. 棄去孔內液體，甩干，洗板 3 次，每次浸泡 1-2 分鐘，大約 350μL/每孔，甩干并在吸水紙 上輕拍將孔內液體拍干。

4. 每孔加酶結合物工作液（臨用前 15 分鐘內配制）100μL，加上覆膜，37℃溫育 30 分鐘。 5. 棄去孔內液體，甩干，洗板 5 次，方法同步驟 3。

6. 每孔加底物溶液(TMB)90μL，酶標板加上覆膜 37℃避光孵育 15 分鐘左右（根據實際顯色狀況酌情縮短或延長，但不可超過 30 分鐘。當標準孔出現明顯梯度時，即可終止）。

7. 每孔加終止液 50μL，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物溶液 的加入順序相同。

8. 立即用酶標儀在 450nm 波長測量各孔的光密度（OD 值）。應提前打開酶標儀電源，預熱儀 器，設置好檢測程序。

9. 實驗完畢后將未用完的試劑按規定的保存溫度放回冰箱保存。 

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