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英文名稱 | Rat (CX3CL1) ELISA Kit | ||
中文名稱 | 大鼠趨化因子CX3C基元配體1(CX3CL1)ELISA試劑盒廠家 | ||
貨號 | YMR30741 | 種屬 | Rat/大鼠 |
規格 | 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips) | ||
檢測方法 | 雙抗體夾心法以及雙抗體一步夾心法(來電索取說明,客戶自行選擇) | ||
檢測范圍 | 添加索取說明書查看 | 靈敏度 | 添加索取說明書查看 |
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大鼠趨化因子CX3C基元配體1(CX3CL1)ELISA試劑盒廠家ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種免疫酶技術。此項技術自70年代初問世以來,發展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學和醫學科學的許多領域。
方法一:用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被:用0.05M PH9,碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml,在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜ye。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml,37℃孵育0.5~1小時,洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
方法二:用于檢測未知抗體的間接法:
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜ye。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗體)0.1ml,37℃孵育30~60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
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技術問答:
問:不同盒子里的孔下次能不能用?
答:一個盒子有96孔和48的 要是真的用不完或標本不多的情況下,做點處理后在存放。
問:做出來的結果:標準品的吸光度呈線性回歸,但是樣品的吸光度都和本體吸光度值接近,正常未予干預的大鼠血漿都基本沒有表達,這是什么原因?
答:樣本、稀釋、室控和機器操作等,原因都可能造成吸光度都和本體吸光度值接近,好像熒光法里面有種試劑盒可以檢測滴度。
問:收集血清的時候用什么管?
答:普通離心管即可。