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人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(ELA2)檢測(cè)ELISA Kit

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人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(ELA2)檢測(cè)ELISA Kit試劑盒性能穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,2017買試劑送禮品活動(dòng)進(jìn)行中,詳詢北京方程生物客服......

詳細(xì)介紹

人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(ELA2)檢測(cè)ELISA Kit北京方程生物免費(fèi)代測(cè):

 【樣品收集】

樣品如果不立即分析,應(yīng)分裝后冷凍保存,且避免反復(fù)凍融。

血清——用干凈試管收集血液,室溫凝固2小時(shí)或4℃過(guò)夜,離心1000×g 10分鐘,收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

細(xì)胞培養(yǎng)、組織勻漿、體液——離心去除沉淀,立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

 人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(ELA2)檢測(cè)ELISA Kit

英文名:Mucin 13, Cell Surface Associated (MUC13)Human

英文簡(jiǎn)寫(xiě):

檢測(cè)范圍:0.78 -50ng/mL

zui低檢測(cè)限:22.9pg/mL

你知道嗎?

顯色和比色(一) 顯色顯色是ELISA中的zui后一步溫育反應(yīng),此時(shí)酶催化無(wú)色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時(shí)間仍是影響顯色的因素。在一定時(shí)間內(nèi),陰性孔可保持無(wú)色,而陽(yáng)性孔則隨時(shí)間的延長(zhǎng)而呈色加強(qiáng)。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進(jìn)行。在定量測(cè)定中,加入底物后的反應(yīng)溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。定性測(cè)定的顯色可在室溫進(jìn)行,時(shí)間一般不需要嚴(yán)格控制,有時(shí)可根據(jù)陽(yáng)性對(duì)照孔和陰性對(duì)照孔的顯色適當(dāng)縮短或延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間,及時(shí)判斷。OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應(yīng)20-30分鐘后即不再加深,再延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間,可使本底值增高。OPD底物液受光照會(huì)自行變色,顯色反應(yīng)應(yīng)避光進(jìn)行,顯色反應(yīng)結(jié)束時(shí)加入終止液終止反應(yīng)。OPD產(chǎn)物用硫酸終止后,顯色由橙黃色轉(zhuǎn)向棕黃色。TMB受光照的影響不大,可在室溫中置于操作臺(tái)上,邊反應(yīng)觀察結(jié)果。但為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性,宜在規(guī)定的適當(dāng)時(shí)間閱讀結(jié)果。TMB經(jīng)HRP作用后,約40分鐘顯色達(dá),隨即逐漸減弱,至2小時(shí)后即可*消退至無(wú)色。TMB的終止液有多種,疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止。這類終止劑尚能使藍(lán)色維持較長(zhǎng)時(shí)間(12-24小時(shí))不褪,是目視判斷的良好終止劑。此外,各類酸性終止液則會(huì)使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色,此時(shí)可用特定的波長(zhǎng)(450nm)測(cè)讀吸光值。(二)比色比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。以軟板為載體的試驗(yàn),需先將板置于標(biāo)準(zhǔn)96孔的座架中,才可進(jìn)行比色。在加底物液顯色前,先將軟板邊緣剪凈,這樣,此板就可*平妥坐入座架中。 比色時(shí)應(yīng)先以蒸餾水校零點(diǎn),測(cè)讀底物孔(未經(jīng)任何反應(yīng)僅加底物液的孔)和空白孔(以生理鹽水或稀釋液代替標(biāo)本作全過(guò)程的孔),以記錄本次試驗(yàn)的試劑狀況。其后可用空白孔以蒸餾水校零點(diǎn),以上各孔的吸光度需減去空白孔的吸光度,然后進(jìn)行計(jì)算。比色結(jié)果的表達(dá)以往通用光密度(oplical density,OD),現(xiàn)按規(guī)定用吸光度(absorbence,A),兩者含義相同。通常的表示方法是,將吸收波長(zhǎng)寫(xiě)于A字母的右下角,如OPD的吸收波長(zhǎng)為492nm,表示方法為"A492nm"或"OD492nm"。(三) 酶標(biāo)儀酶標(biāo)比色儀簡(jiǎn)稱酶標(biāo)儀,通常指于測(cè)讀ELISA結(jié)果吸光度的光度計(jì)。針對(duì)固相載體形式的不同,各有特制的適用于板、珠和小試管的設(shè)計(jì)。許多試劑公司配套供應(yīng)酶標(biāo)儀。酶標(biāo)儀的主要性能指標(biāo)有:測(cè)讀速度、讀數(shù)的準(zhǔn)確性、重復(fù)性、精確度和可測(cè)范圍、線性等等。優(yōu)良的酶標(biāo)儀的讀數(shù)一般可精確到0.001,準(zhǔn)確性為±1%,重復(fù)性達(dá)0.5%。舉例說(shuō),若某孔測(cè)得的A值為1.083,則該孔相對(duì)于空氣的真實(shí)A值應(yīng)為1.083±0.01(1.073~1.093),重復(fù)測(cè)定數(shù)次,其A值均應(yīng)1.083±0.05(1.078~1.088)在之間。酶標(biāo)儀的可測(cè)范圍視各酶標(biāo)儀的性能而不同。普通的酶標(biāo)儀在0.000~2.000,新型號(hào)的酶標(biāo)儀上限拓寬達(dá)2.900,甚至更高。超出可測(cè)上限的A值常以"*"或"over"或其它符號(hào)表示。應(yīng)注意可測(cè)范圍與線性范圍的不同,線性范圍常小于可測(cè)范圍,比如某一酶標(biāo)儀的可測(cè)范圍為0.000~2.900,而其線性范圍僅0.000~2.000,這在定量ELISA中制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)應(yīng)予注意。酶標(biāo)儀不應(yīng)安置在陽(yáng)光或強(qiáng)光照射下,操作時(shí)室溫宜在15~30℃,使用前先預(yù)熱儀器15-30分鐘,測(cè)讀結(jié)果更穩(wěn)定。測(cè)讀A值時(shí),要選用產(chǎn)物的敏感吸收峰,如OPD用492nm波長(zhǎng)。有的酶標(biāo)儀可用雙波長(zhǎng)式測(cè)讀,即每孔先后測(cè)讀兩次,*次在zui適波長(zhǎng)(W1),第二次在不敏感波長(zhǎng)(W2),兩次測(cè)定間不移動(dòng)ELISA板的位置。例如OPD用492nm為W1,630nm為W2,zui終測(cè)得的A值為兩者之差(W1-W2)。雙波長(zhǎng)式測(cè)讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。各種酶標(biāo)儀性能有所不同,使用中應(yīng)詳細(xì)新聞?dòng)浾哒f(shuō)明書(shū)。

 

趨化因子C-C-基元受體3(CCR3)

生長(zhǎng)激素(GH)

彈性蛋白酶4(ELA4)

血小板衍生生長(zhǎng)因子AA(PDGFAA)

中性粒細(xì)胞明膠酶關(guān)聯(lián)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)

*11(KLK11)

干擾素調(diào)節(jié)因子9(IRF9)

S100鈣結(jié)合蛋白A9(S100A9)

前列腺素E合酶(PTGES)

丙二醛(MDA)

堿性鞘磷脂磷酸二酯酶(Alk-Smase)

性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)

*S轉(zhuǎn)移酶π1(GSTπ1)

前動(dòng)力蛋白受體1(PKR1)

過(guò)氧化還原酶5(PRDX5)

*4(KLK4)

*/*豐富剪接因子4(SRSF4))

抗繆勒管激素(AMH)

胸苷嘧啶DNA糖基化酶(TDG)

白介素12(IL12)

性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)

尾加壓素2(UST2)

表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白A(SPA)

前胰淀粉樣蛋白(ProIAPP)

淋巴細(xì)胞功能關(guān)聯(lián)抗原1α(LFA1α)

細(xì)胞外基質(zhì)蛋白1(ECM1)

花生四烯酸-5-脂加氧酶(ALOX5)

 

關(guān)鍵詞:比色儀 酶標(biāo)儀
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