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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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豚鼠elisa試劑盒技術(shù)中濃度的選擇條件
2017-10-10 閱讀(588)
在豚鼠elisa試劑盒技術(shù)中，首先要確定的變異因素就是酶標(biāo)記物的工作濃度。因為酶標(biāo)記物濃度的很小變化，便可導(dǎo)致試驗結(jié)果產(chǎn)生很大的波動。另外，由于濃度過高，可使非特異性反應(yīng)增加，而濃度過低又可影響測定的敏感性。因此，正式試驗前必須準(zhǔn)確滴定其工作濃度。
1. 酶標(biāo)記抗體的滴定方法是：將抗原（或抗體）物理吸附于固相載體上，然后將經(jīng)過一系列稀釋的酶標(biāo)抗體（或抗Ig抗體）與吸附在載體上的抗原（或抗體）起反應(yīng)，以酶與底物的顯色反應(yīng)程度來確定酶標(biāo)記抗體的效價，或稱工作濃度。
2. 其步驟為：先將抗原（或抗體）用0.05M PH9.6包被緩沖液稀釋為10μg/ml左右，于聚苯乙烯板孔內(nèi)加0.1ml，4℃一夜，次日以洗滌緩沖液洗滌3次。酶標(biāo)記抗體用1%BSA-PBS液依次稀釋成1:100，1:200，1:400，1:800，1:1600（根據(jù)據(jù)抗體的滴度而定），分別加入反應(yīng)孔中，每個稀釋度二孔，每孔0.1ml，37℃孵育1小時后洗滌。然后加底物液，每孔0.1ml，37℃10～30分鐘。以2M H２SO4 0.05ml終止反應(yīng)。
3. 結(jié)果判定主要以ELISA比色儀讀取各孔OD值，并以O(shè)D為縱座標(biāo)，結(jié)合物濃度為橫座標(biāo)，繪制滴定曲線。由曲線上查得OD值為1.0左右，且豚鼠elisa試劑盒曲線斜率zui大時的酶標(biāo)抗體稀釋度，即為該標(biāo)記物的工作濃度。
乳酪產(chǎn)品中梭菌的計數(shù) Tybobutyricum Broth Base 250克 TBB培養(yǎng)基
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厭氧菌的分離培養(yǎng) WILKINS-CHALGREN Agar 250克 WILKINS-CHALGREN厭氧菌瓊脂
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用于梭菌和其他厭氧菌的分離培養(yǎng) Anaerobic Agar 250克 GAM瓊脂
用于專性厭氧菌培養(yǎng) Anaerobic Broth 250克 GAM肉湯
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產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計數(shù) TSC Agar 250克 TSC瓊脂
產(chǎn)氣莢膜梭菌的培養(yǎng) PY Medium 250克 PY培養(yǎng)基
豚鼠elisa試劑盒
