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上海莼試生物技術有限公司
主營產品： ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價格，ELISA試劑盒報價 |
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人補體片斷3a（C3a）ELISA試劑盒使用說明書
2017-11-23 閱讀(161)
| 提 供 商 | 上海莼試生物技術有限公司 | 資料大小 | 75.6KB |
|---|---|---|---|
| 資料圖片 | 下載次數 | 26次 | |
| 資料類型 | JPG 圖片 | 瀏覽次數 | 161次 |
人補體片斷3a（C3a）ELISA試劑盒使用目的：
本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中補體片斷3a（C3a）含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人補體片斷3a（C3a）水平。用純化的人補體片斷3a（C3a）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入補體片斷3a（C3a），再與HRP標記的補體片斷3a（C3a）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的補體片斷3a（C3a）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人補體片斷3a（C3a）濃度。
試劑盒組成
1
30倍濃縮洗滌液
20ml×1瓶
7
終止液
6ml×1瓶
2
酶標試劑
6ml×1瓶
8
標準品（320μg/ml）
0.5ml×1瓶
3
酶標包被板
12孔×8條
9
標準品稀釋液
1.5ml×1瓶
4
樣品稀釋液
6ml×1瓶
10
說明書
1份
5
顯色劑A液
6ml×1瓶
11
封板膜
2張
6
顯色劑B液
6ml×1/瓶
12
密封袋
1個
人補體片斷3a（C3a）ELISA試劑盒標本要求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
160μg/ml
5號標準品
150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
80μg/ml
4號標準品
150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
40μg/ml
3號標準品
150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
20μg/ml
2號標準品
150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
10μg/ml
1號標準品
150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
溫育：操作同3。
洗滌：操作同5。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
人補體片斷3a（C3a）ELISA試劑盒測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
