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上海莼試生物技術有限公司
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小鼠elisa試劑盒的測定
2017-7-3 閱讀(237)
小鼠elisa試劑盒在ELISA試劑盒中通常有3次加樣步聚,即加標本,加酶物,加底物。加樣時應將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部,防止加在孔壁上部,并留意不行濺起,不行發(fā)作氣泡。
加標本通常用微量加樣器,按規(guī)定的量參加板孔中。每次加標本應更換吸嘴,避免發(fā)作穿插污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。
有此測定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中參加稀釋液,再在其間參加血清標本,然后在微型震動器上震動1分鐘以確?;旌汀<用肝锸褂靡汉偷孜锸褂靡簳r可用定量多道加液器,使加液進程敏捷完結。在ELISA試劑盒中通常有兩次抗原抗體反響,即加標本和加酶物后。抗原抗體反響的完結需求有必定的溫度和時刻,小鼠elisa試劑盒這一保溫進程稱為溫育(incubation),有人稱之為孵育,在ELISA檢查試劑盒中似不恰當。
ELISA試劑盒屬固相免疫測定,抗原、抗體的只在固相表面上發(fā)作。以抗體包被的夾心法為例,參加板孔中的標本,其間的抗原并不是都有平等的和固相抗的時機,只要zui靠近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體觸摸。這是一個逐,因而需經分散才干到達反響的結尾。在這以后參加的酶符號抗體與固相抗原的也同樣如此。這就是為何ELISA檢查試劑盒反響老是需求必定時刻的溫育。
溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫文4℃(冰箱溫度)等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數抗原抗體的適宜溫度。在樹立ELISA辦法作反響動力學研討時,實驗標明,兩次抗原抗體反響通常在37℃經1-2小時,產品的生成可達高峰。為加快反響,可進步反響的溫度,有些實驗在43℃進行,但不宜選用更高的溫度。抗原抗體反響4℃更為*,在放射免疫測定中多使反響在冰箱中,以構成zui多的沉積。但因所需時刻太長,在ELISA試劑盒中通常不予選用。
ELISA試劑盒的質量凹凸要素取決于這兩個方面
1.選材目標。
2.選材進程。
胎牛血清用于選材的胎牛應健康無病并且在的出世天數以內,選材進程應嚴厲依照操作規(guī)程履行,制備出的血清要通過嚴厲的質量判定。格外請求有:
a.要通過濾膜過濾除菌,確保無菌;
b.證實所用血清中不含對所疫苗病毒的按捺物;
c.無細菌、霉菌、支原體和病毒的污染,有些國家請求無細菌噬菌體污染;
d.對細胞有良好的支撐繁衍效果;
e.有必要來自有文件證實無牛海綿狀腦病的牛群或國家。并應具備恰當的監(jiān)測體系。
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小鼠elisa試劑盒