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上海莼試生物技術有限公司
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避免大鼠elisa試劑盒洗板產生氣泡的方法?
2018-3-26 閱讀(88)
在大鼠elisa試劑盒的操作過程中,因試劑盒、操作方法等因素會對實驗有著輕重不一的影響。今天上海恒遠生物技術整理出幾條實驗經驗,這樣能避免Elisa洗板產生氣泡,您竟然還不知道?
1.可以用tip吸走,但實驗中費事、效果還不是很理想;
2.采用更好材質的板、或采用專門的96孔板振蕩器,需要花費更多的錢;
3.使用注射器針頭扎破,費事(同方法1)。
4.建議:我們覺得zui簡單方便的一種,是使用吹風機(理發店吹頭發帶加熱的那種),將吹風機打開,并調節到zui高溫度,對96孔板吹1-2秒就可以了。
1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃放置一個晚上。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3.加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。
4.加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5.大鼠elisa試劑盒終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6.結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號表示。也可測OD值:在Elisa檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
ASB3 錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體
Aurora C 有絲分裂激酶B抗體
Phospho-Ack1 磷酸化Ack1抗體
Phospho-Ack1 磷酸化Ack1抗體
Phospho-beta-Arrestin 1 磷酸化β抑制蛋白1抗體
Phospho-Aurora A 磷酸化有絲分裂激酶A抗體
phospho-APS 磷酸化APS抗體
Aurora A 有絲分裂激酶A抗體
AIM2 干擾素誘導蛋白AIM2抗體
Aquaporine 2 水通道蛋白-2抗體
大鼠elisa試劑盒