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上海邦景實業有限公司
主營產品: 進口elisa試劑盒,細胞株,細胞系,菌種 |

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更新時間:2022-12-05 09:55:52瀏覽次數:166
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操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
商品屬性:
產品名稱:人肺癌細胞株:MSTO-211H
貨號:BJ-X96482
規格:1×10?cells/T25培養瓶
分類:細胞系
商品介紹:
名稱 MSTO-211H (人肺癌細胞株) 種屬 人類 年齡(性別) 男性,62歲 組織來源 二相間皮瘤肺轉移灶 生長特性 貼壁細胞 細胞形態 成纖維細胞樣 背景描述 MSTO-211H細胞是于1985年從一位肺二相間皮瘤患者的胸水中建株的,這個病人接受過多種藥物聯合前期。MSTO-211H細胞具有高親和力的EGF結合位點,并表達神經元特異性烯醇酶(NSE)及人絨毛膜(HCG)的α與β亞基;未檢測到胺脫羧酶(DDC)、邦巴辛與神經Tensin。MSTO-211H細胞過表達c-myc原癌基因,并沒有觀察到基因重排或擴增。MSTO-211H細胞V-src、v-abl、v-erbB、c-raf1、Ha-ras、Ki-ras和N-ras的表達呈陽性;未檢測到N-myc、L-myc、c-myb、c-fos、v-fes、v-fms和v-sis癌基因的表達。MSTO-211H細胞的飽和濃度能達到4×10^5/cm^2,但達到這個濃度時就會從表面脫落。 生物安全等級 1 生長培養基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例 1:3-1:4 推薦換液頻率 2~3次/周 倍增時間 ~30-40小時 凍存條件 凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 致瘤性 Yes, tumors for med in approximately 20% of nude mice inoculated with MSTO-211H cells. 保藏機構 ATCC; CRL-2081 DSMZ; ACC-390 |
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:產品僅用于科研
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
蒼白芽孢桿菌 細黃鏈霉菌
白色念珠菌凍干粉 肺炎克雷伯菌凍干粉
銅綠假單胞菌 費氏志賀氏菌
大腸埃希氏菌(大腸桿菌) 解淀粉芽孢桿菌
尖鱗黃傘 凸形假單胞桿菌
脂酰肌醇激酶
骨形態發生蛋白4
蛋白酸酯酶-1
骨成型蛋白受體1A
D型-過氧化酶活化增生受體
人肺癌細胞株:MSTO-211H大鼠金屬硫蛋白3(MT3)elisa檢測試劑盒
大鼠金屬轉運蛋白1(MTP1)elisa分析檢測試劑盒
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大鼠緊密連接蛋白(Ocln)elisa分析檢測試劑盒