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上海邦景實業有限公司

主營產品: 進口elisa試劑盒,細胞株,細胞系,菌種

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大鼠小腦顆粒細胞
大鼠小腦顆粒細胞
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  • 所在地 上海市

更新時間:2022-05-17 16:11:21瀏覽次數:160

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【簡單介紹】
貨號  BJ-X97363
大鼠小腦顆粒細胞公司的各類產品:鈣營養蛋白1/鈣結合蛋白8抗體 絲/蛋白激酶SAD-B抗體
鈣結合蛋白5/3抗體 絲/蛋白激酶Plk1抗體
鈣0蛋白1抗體 絲/蛋白激酶PIM3抗體
鈣0蛋白2抗體 絲/蛋白激酶PCTK2抗體
0酸化鉀通道相互作用蛋白3抗體 絲/蛋白激酶NEK9抗體

商品介紹:
名稱   大鼠小腦顆粒細胞
2.組織來源:腦組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

大鼠小腦顆粒細胞分離自小腦皮層組織;神經元是神經系統基本的結構與功能單位,小腦顆粒神經元是體積較小的神經元,直徑約10μm,在中樞神經系統中含量非常豐富,近乎神經元數量的一半。由于小腦神經元的生長、分化和大腦皮層神經元相似,而且數量多、便于取材,因此小腦顆粒神經元是研究神經元生長發育、神經軸突再生及神經疾病發生機制和臨床神經藥理的重要手段。小腦顆粒神經元是小腦主要的中間神經元,在哺乳動物的小腦內數量為豐富。顆粒神經元的軸突與苔狀纖維和爬行纖維相聯系,形成小腦皮層內的神經元環路,在小腦的神經活動中起著非常重要的作用。在動物傳染性海綿狀腦病中,病變可波及小腦顆粒神經元,導致小腦皮層的神經元環路受損,從而呈現神經性行為失調。研究小腦顆粒神經元在動物傳染性海綿狀腦病病理學變化中的反應、病理發生的機理特別是分子機理,有賴于小腦顆粒神經元細胞模型的建立。小腦顆粒細胞的軸突是沿冠狀軸分布的平行纖維,正是這種排列保證了興奮的單向傳導,這是小腦功能理論中的關鍵假設,小腦顆粒細胞通過g-氨基丁酸接受戈爾吉細胞的抑制性突觸的信息傳入。

5.方法簡介:

公司實驗室分離的大鼠小腦顆粒細胞采用消化法結合神經元專用培養基、化學試劑抑制法篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

公司實驗室分離的大鼠小腦顆粒細胞NSE免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

包被條件 PLL0.1mg/ml

培養基 B-27PenicillinStreptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 神經元細胞樣

傳代特性 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群

消化液 0.25%

培養條件 氣相:空氣,95%CO25%

產品名稱

規格

分類

貨號

大鼠小腦顆粒細胞

5×10?Cells/T25培養瓶

原代細胞

BJ-X97363

細胞培養的優點:

1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.
研究條件可以人為控制
pH
、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.
研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.
研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.
研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.
研究的費用相對較經濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
實驗報告:          

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1%   I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ 5CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min

2PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1Triton   X-100透膜15min

3PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 

實驗要點及說明:
1
.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2
.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4
.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5
.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

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