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上海邦景實業有限公司
主營產品: 進口elisa試劑盒,細胞株,細胞系,菌種 |

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更新時間:2022-05-10 15:03:45瀏覽次數:157
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操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
商品屬性:
產品名稱:人直腸黏膜上皮細胞
貨號:BJ-X97164
規格:5×10?Cells/T25培養瓶
分類:原代細胞
商品介紹:
名稱 人直腸黏膜上皮細胞 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 人直腸黏膜上皮細胞分離自直腸組織;直腸為大腸的未段,位于小骨盆內。上端平第3骶椎處接續乙狀結腸,沿骶骨和尾骨的前面下行,穿過盆膈,下端以而終。直腸上端的大小似結腸,其下端擴大成直腸壺腹,是糞便排出前的暫存部位,下端變細接肛管。直腸在盆腔內的位置與骶椎腹面關系密切,與骶椎有相同的曲度。直腸周圍多脂肪、無縱帶,位于膀胱和生殖器官的背側。直腸的動脈血供主要是來自腸系膜下動脈的直腸上動脈,來自髂內動脈的直腸中動脈和來自髂內動脈的直腸下動脈。腸黏膜上皮細胞是機體內外環境的重要屏障,持續暴露于大量抗原中,也是機體面對病原微生物的第一道防線。因此,腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉運等重要生理功能之外,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞,在黏膜免疫反應的起始階段發揮關鍵作用,它決定黏膜免疫反應的發生、性質和強度。 5.方法簡介: 公司實驗室分離的人直腸黏膜上皮細胞采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 公司實驗室分離的人直腸黏膜上皮細胞經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 上皮細胞樣 傳代特性 可傳2-3代 消化液 0.25% 培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:產品僅用于科研
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
金頂側耳、榆黃磨、金頂磨 臥孔菌
臭曲霉 紅曲霉
大禿馬勃 伊氏李斯特氏菌 模式菌株。研究、質量控制
化膿性鏈球菌 英諾克李斯特氏菌 模式菌株。分類;研究;培養基質量控制,李斯特氏菌檢測質控菌株
宋內志賀菌CMCC51592凍干粉 紅曲霉
大鼠顆粒酶A(Gzms-A)elisa分析檢測試劑盒
大鼠抗中性粒細胞核周抗體(pANCA)elisa分析檢測試劑盒
大鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)elisa分析檢測試劑盒
大鼠抗增殖細胞核抗原(PCNA)抗體elisa分析檢測試劑盒
大鼠抗(AT)elisa分析檢測試劑盒
人直腸黏膜上皮細胞人CD68分子(CD68)elisa檢測試劑盒
人CD6分子(CD6)elisa分析檢測試劑盒
人CD6分子(CD6)elisa檢測試劑盒
人CD73分子(CD73)elisa分析檢測試劑盒
人CD73分子(CD73)elisa檢測試劑盒