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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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更新時(shí)間:2022-05-10 15:03:45瀏覽次數(shù):159
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操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱:人直腸黏膜上皮細(xì)胞
貨號:BJ-X97164
規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
分類:原代細(xì)胞
商品介紹:
名稱 人直腸黏膜上皮細(xì)胞 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介: 人直腸黏膜上皮細(xì)胞分離自直腸組織;直腸為大腸的未段,位于小骨盆內(nèi)。上端平第3骶椎處接續(xù)乙狀結(jié)腸,沿骶骨和尾骨的前面下行,穿過盆膈,下端以而終。直腸上端的大小似結(jié)腸,其下端擴(kuò)大成直腸壺腹,是糞便排出前的暫存部位,下端變細(xì)接肛管。直腸在盆腔內(nèi)的位置與骶椎腹面關(guān)系密切,與骶椎有相同的曲度。直腸周圍多脂肪、無縱帶,位于膀胱和生殖器官的背側(cè)。直腸的動(dòng)脈血供主要是來自腸系膜下動(dòng)脈的直腸上動(dòng)脈,來自髂內(nèi)動(dòng)脈的直腸中動(dòng)脈和來自髂內(nèi)動(dòng)脈的直腸下動(dòng)脈。腸黏膜上皮細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障,持續(xù)暴露于大量抗原中,也是機(jī)體面對病原微生物的第一道防線。因此,腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)等重要生理功能之外,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機(jī)制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞,在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用,它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強(qiáng)度。 5.方法簡介: 公司實(shí)驗(yàn)室分離的人直腸黏膜上皮細(xì)胞采用先機(jī)械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: 公司實(shí)驗(yàn)室分離的人直腸黏膜上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣 傳代特性 可傳2-3代 消化液 0.25% 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:產(chǎn)品僅用于科研
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
金頂側(cè)耳、榆黃磨、金頂磨 臥孔菌
臭曲霉 紅曲霉
大禿馬勃 伊氏李斯特氏菌 模式菌株。研究、質(zhì)量控制
化膿性鏈球菌 英諾克李斯特氏菌 模式菌株。分類;研究;培養(yǎng)基質(zhì)量控制,李斯特氏菌檢測質(zhì)控菌株
宋內(nèi)志賀菌CMCC51592凍干粉 紅曲霉
大鼠顆粒酶A(Gzms-A)elisa分析檢測試劑盒
大鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)elisa分析檢測試劑盒
大鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)elisa分析檢測試劑盒
大鼠抗增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)抗體elisa分析檢測試劑盒
大鼠抗(AT)elisa分析檢測試劑盒
人直腸黏膜上皮細(xì)胞人CD68分子(CD68)elisa檢測試劑盒
人CD6分子(CD6)elisa分析檢測試劑盒
人CD6分子(CD6)elisa檢測試劑盒
人CD73分子(CD73)elisa分析檢測試劑盒
人CD73分子(CD73)elisa檢測試劑盒