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上海邦景實業(yè)有限公司

主營產(chǎn)品: 進口elisa試劑盒,細胞株,細胞系,菌種

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公司信息

聯(lián)人:
劉小姐
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021-52960952
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021-57690166
址:
上海市閔行區(qū)碧泉路36弄銀宵大廈
編:
200000
網(wǎng)址:
www.bhsy-e.com/
鋪:
http://www.598km.com/st582730/
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高純度質(zhì)粒小提試劑盒(1~4mL)
高純度質(zhì)粒小提試劑盒(1~4mL)
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具體成交價以合同協(xié)議為準
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  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 所在地 上海市

更新時間:2022-05-30 14:53:52瀏覽次數(shù):543

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【簡單介紹】
編號 BJ-F0163459
高純度質(zhì)粒小提試劑盒(1~4mL)及公司其它各類產(chǎn)品:載玻片細胞CYTOCHROME C蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
細胞CYTOCHROME C蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒
MAPK蛋白表達ELISA檢測試劑盒
MAPK蛋白免疫共沉淀分析試劑盒
MAPK蛋白表達西方雜交分析試劑盒

生物醫(yī)學(xué)實驗中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來,此操作非常繁瑣,并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點,本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
中文名稱:高純度質(zhì)粒小提試劑盒(14mL)
英文名稱:Plasmid Miniprep Kit(1-4mL)
產(chǎn)品規(guī)格:50
發(fā)貨周期:13
產(chǎn)品貨號:BJ-F0163459
產(chǎn)品介紹:

本試劑盒通過堿裂解法裂解細胞,新型的硅基質(zhì)膜專一結(jié)合DNA,在特定條件下,有效去除內(nèi)毒素、基因組DNARNA、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)。每次可抽提14mL菌液,抽提獲得的質(zhì)粒量會受質(zhì)粒拷貝數(shù),細胞培養(yǎng)濃度等因素影響。由本試劑盒所得的質(zhì)粒可直接用于細胞轉(zhuǎn)染,DNA測序,PCR,基于PCR的突變,體外轉(zhuǎn)錄,轉(zhuǎn)化細菌,內(nèi)切酶消化等下游實驗。

保存條件:

室溫條件下,可保存12個月,更長時間保存可置于4℃。若溶液產(chǎn)生沉淀,可在室溫下放置一段時間,或在37℃水浴中預(yù)熱10min,以溶解沉淀。

使用建議:

如果所提質(zhì)粒為低拷貝質(zhì)粒或大10kb的大質(zhì)粒,應(yīng)加大菌體使用量,使用510mL過夜培養(yǎng)物,同時按照比例增加P1P2P3的用量,洗脫緩沖液EB應(yīng)在6570℃水浴預(yù)熱,在吸附和洗脫時可以適當?shù)难娱L時間,以增加提取效率。其它步驟相同。

注意事項:

溶液P1Buffer P1)在使用前先加入RNase A(全部加入),混勻,4℃保存。

漂洗液PWBuffer PW)使用前應(yīng)加入48mL無水乙醇。

溶液P2Buffer P2)低于室溫會產(chǎn)生沉淀,使用前應(yīng)檢查是否出現(xiàn)渾濁,如有渾濁現(xiàn)象,50℃水浴加熱溶解。溶液P2Buffer P2)使用后請擰緊瓶蓋。

溶液P2P3對人體有刺激性,操作時請小心,不要直接接觸。

提取的質(zhì)粒量與細菌培養(yǎng)濃度、質(zhì)粒拷貝數(shù)等因素有關(guān)。

去蛋白液PE可以有效去除殘留的蛋白污染,當宿主菌為endA+ TG1BL21HB101ET12567JM系列)等核酸酶含量較高的菌株時,烈推薦使用去蛋白液PE

操作步驟:

漂洗液PW在使用前按照試劑瓶所示體積加入無水乙醇,混合均勻。

14mL過夜培養(yǎng)的菌液,加入離心管中,室溫下10000rpm離心1min,收集菌體,并盡可能地吸盡上清。

向留有菌體沉淀的離心管中加入250μL溶液P1Buffer P1) (請先檢查是否已加入RNase A),使用移液器或渦旋振蕩器*懸浮細菌沉淀。

向離心管中加入250μL溶液P2Buffer P2),輕輕顛倒離心管10次以混合均勻,然后靜置5min至溶液粘稠而澄清。

注意:不要劇烈震蕩,以免造成所提質(zhì)粒中基因組DNA污染。此時菌液應(yīng)變得清亮粘稠,所用時間不應(yīng)過5min,以免質(zhì)粒受到破壞。如果溶液未變得清亮,可能菌體量過多,裂解不*,應(yīng)減少菌體量。向離心管中加入250μL溶液P2,輕輕顛倒離心管混勻68次,使菌體充分裂解。

向離心管中加入350μL溶液P3Buffer P3),立即上下顛倒混勻68次,此時出現(xiàn)白色絮狀沉淀。室溫下13000rpm離心10min

注意:P3加入后應(yīng)立即混合,避免產(chǎn)生局部沉淀。

小心吸取上清液轉(zhuǎn)移到帶有收集管的吸附柱中,室溫下13000rpm離心1min,移除收集管中的廢液,將吸附柱放回收集管中。

注意:洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于50μL,體積過小影響回收效率。洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響。若后續(xù)做測序,需使用ddH2O做洗脫液,并保證其pH值在7.08.5范圍內(nèi),pH值低于7.0會降低洗脫效率。且DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃,以防DNA降解。為了增加質(zhì)粒的回收率,可將得到的溶液重新加入吸附柱中,再次離心收集。

向吸附柱中加入500μL溶液PEBuffer PE),室溫下13000rpm離心1min,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管。

注:溶液PEBuffer PE)可以有效去除殘留的蛋白污染,當宿主菌為endA+ TG1BL21HB101ET12567JM系列)等核酸酶含量較高的菌株時,烈推薦使用Buffer PE

向吸附柱中加入500μL溶液PWBuffer PW)(請先檢查是否已加入無水乙醇),室溫下13000rpm離心1min,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱放回收集管中。

重復(fù)操作步驟7

將吸附柱放入收集管中,打開蓋子,室溫下13000rpm離心510min,目的是將吸附柱中殘留的乙醇去除。

注意:漂洗液中乙醇的殘留會影響后續(xù)的酶反應(yīng)(酶切、PCR等)實驗,建議將吸附柱CM開蓋,置于室溫放置數(shù)分鐘。

將吸附柱轉(zhuǎn)移至一個的1.5mL離心管中,向吸附膜的中間部位滴加50100μL洗脫液EBBuffer EB)ddH2O,室溫放置2min13000rpm離心1min,收集洗脫液。

使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標本。同時也將標本有關(guān)信息填在標本送檢表上,連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標本,可以放在同一個二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(nèi)(或疫苗運輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2)運送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內(nèi)送達,則應(yīng)盡快在-70以下保存。無-70條件的,需在4冰箱短時間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標本。流感病毒在-20-40時不穩(wěn)定,故長期保存最好在-70溫度以下進行。

QQ截圖20220307153709.png

注意事項:
加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物AB液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
熒光定量檢測試劑盒

P450亞酶CYP1A1EROD)活性熒光定量檢測試劑盒

體外非細胞系統(tǒng)P450亞酶CYP1A1EROD)活性

P450亞酶CYP1A2MROD)活性熒光定量檢測試劑盒

體外非細胞系統(tǒng)P450亞酶CYP1A2MROD)活性
(標準品)  Oxiconazole Nitrate  質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定 大鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA檢測試劑盒Ratoxidizedlowdensitylipoproteinaibody,OLAbELISAKit 96T/48T

普(標準品)  Pregabalin  質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定 人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)試劑盒 Human IL-2sRα ELISA Kit

(S)-(+)-苯乙醇酸(普雜質(zhì))(標準品)  [(S)-(+)-MandelicAcid] Pregabalin impurity  質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 英文名稱MouseTissuefactorpathwayinhibitorELISAKit小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)規(guī)格:96T/48T

(標準品)  D-Sorbitol  質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 PARP蛋白共沉淀分析試劑盒5

乙二醇(標準品)  Ethylene Glycol  質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 Porcineplateletactivatingfactor,PAFelisa豬血小板活化因子(PAF)elisa規(guī)格:96T/48T

降二  Nordihydrocapsaicin  質(zhì)量規(guī)格:HPLC95%,標準品 小鼠甘油-3-0酸脫氫酶(GAPDH)elisa ,英文名: GAPDH ELISA Kit

4-甲氨基安替(標準品)  4-(Methylamino)-antipyrine  質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 人肺耐藥蛋白(LRP)ELISA檢測試劑盒HumanLungresistance-relatedprotein,LRPELISAKit 96T/48T

硫酸肼(標準品)  Hydrazine sulfate  質(zhì)量規(guī)格:供TLC法系統(tǒng)適用性試驗用 大鼠上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)試劑盒 Rat Epithelial neuophil activating peptide 78,ENA-78 ELISA Kit

硫酸肼(標準品)  Hydrazine sulfate  質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 英文名稱RatFIXELISAKit大鼠IX規(guī)格:96T/48T

(標準品)  Cyclandelate  質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定 活體細胞氧化應(yīng)激活性氧(ROS)原位染色試劑盒(氧陰離子)100
高純度質(zhì)粒小提試劑盒(14mL)N-硝基-L-精甲酯  N'-Nitro-L-arginine-methyl ester   質(zhì)量規(guī)格:>98% 人不對稱二甲基精(ADMA)試劑盒 Human asymmeical dimethylarginine,ADMA ELISA Kit

N-苯甲酰-L-酪乙酯(BTEE)  N-Benzoyl-L-tyrosine ethyl ester  質(zhì)量規(guī)格:>98% 人不透光相關(guān)蛋白(OPAs)ELISA檢測試劑盒HumanOpacity-associatedproteins,OPAsELISAKit 96T/48T

AEBSF絲抑制劑  AEBSF HCl  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人布盧姆綜合征蛋白(BLM)試劑盒 Human BLM ELISA Kit

AEBSF(進分)  AEBSF HCl  質(zhì)量規(guī)格:>97%,進分TCI A2215 人布魯氏菌抗體IgG(Brucella Ab IgG)試劑盒 Human Brucella Aibody IgG,Brucella Ab IgG ELISA Kit

鹽酸貝他定(進口)  Bestatin HCl  質(zhì)量規(guī)格:≥98%,美國進口 人層連蛋白/板層素(LN)試劑盒 Human Laminin,LN ELISA KIT

鄰菲啰啉鹽酸鹽,一水  1,10-Phenanthroline  monohydrate  質(zhì)量規(guī)格:>99% 人層粘連蛋白-5(LN-5)試劑盒 Human Laminin-5,LN-5 ELISA Kit

膦酰二肽鈉  Phosphoramidon di salt  質(zhì)量規(guī)格:0.99 人層粘連蛋白β1(LN-β1)試劑盒 Human Laminin β1,LN-β1 ELISA Kit

癸基喃葡萄糖;癸基吡喃葡萄糖苷  Decyl β-D-glucopyranoside   質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人層粘連蛋白亞基γ-2(LAMC2)試劑盒 Human LAMC2 ELISA Kit

德羅特韋(GSK-1349572,DTG)  Dolutegravir,GSK1349572  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人腸道病毒71(EV71)抗體(IgM)試劑盒 Human eerovirus 71 virus(EV71)aibody(gM)ELISA kit

十二烷基吡喃葡萄糖苷;月桂酰基喃葡萄糖  Dodecyl glucopyranoside  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 人腸三葉因子(ITF)試劑盒 Human Iestinal efoil factor,ITF ELISA Kit
操作規(guī)程
1
、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升500010000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2
.加入適當濃度的010μL 受試化合物。
3
、將96孔板在37,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4
、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5
、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6
、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7
、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8
、結(jié)果分析
 a
、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD×100
 b
、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)




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