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上海邦景實業有限公司
主營產品： 進口elisa試劑盒，細胞株，細胞系，菌種 |
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更新時間：2022-05-30 14:44:24瀏覽次數：178
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中文名稱：去內毒素質粒小量提取試劑盒(1～5mL)
英文名稱：Free Endotoxin Plasmid DNA Extraction Mini Kit(1-5mL)
產品規格：50T|100T
發貨周期：1～3天
產品貨號：BJ-F0163451
生物醫學實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細小，傳統的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統方法的缺點，本公司開發了本產品。產品介紹：
本試劑盒采用堿裂解法裂解細胞，根據離心吸附柱在高鹽狀態下特異性地結合溶液中的DNA的原理特異性提取質粒DNA。離心吸附柱中采用的硅基質材料能高效、專一地吸附DNA，可大限度去除雜質蛋白及細胞中其他有機化合物。研制的內毒素清除劑，可大限度地除去內毒素。從1～5mL大腸桿菌LB培養液中，可快速提取5～15μg高純度質粒DNA，提取率達85～90%。使用本試劑盒提取的質粒DNA純度高，可直接用于細胞轉染等要求較高的實驗，以及其他各種常規操作，包括酶切、PCR、測序、連接和轉化等試驗。 保存：常溫干燥保存，復檢期為一年。 注意： 使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶體上的標簽。溶液P1在使用前先將試劑盒中提供的RNase A全部加入，混勻，置于2～8℃保存。如非指明，所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。 操作步驟： 取1～5mL細菌培養物，12000rpm離心1min，吸除上清（菌液濃度較低時可多次離心收集到一個離心管中）。 向留有菌體沉淀的離心管中加入200μL溶液P1(請先檢查是否已加入RNase A），使用移液器或旋渦振蕩器*懸浮細菌細胞沉淀。 注意：如果菌塊未*混勻，會影響裂解導致質粒提取量和純度偏低。 向離心管中加入200μL溶液P2，溫和地上下翻轉6～8次使菌體充分裂解。 注意：混勻一定要溫和，以免污染細菌基因組DNA，此時菌液應變得清亮粘稠，作用時間不要過5min，以免質粒受到破壞。 向離心管中加入200μL溶液P3，立即溫和地上下翻轉6～8次，充分混勻，此時會出現白色絮狀沉淀。12000rpm 離心10min，用移液器小心地將上清轉移到另一個干凈的離心管中，盡量不要吸出沉淀。 注意：溶液P3加入后應立即混合，避免產生局部沉淀。如果上清中還有微小白色沉淀，可再次離心后取上清。 加入上清1/5體積的冰上預冷的內毒素清除劑，振蕩混勻，溶液變渾濁，冰浴2min至溶液變清亮。 37℃水浴5min，不時振蕩，溶液又變渾濁。12000rpm室溫離心5min，溶液應分為兩相，上層水相含質粒DNA，下層油相含內毒素。 將含質粒DNA的上層水相轉移至新管，棄下層油相，注意不要吸入油狀相。重復步驟5～7三次。 加入600μL的溶液P4，充分混勻后加入吸附柱中，室溫放置2min，12000rpm離心1min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。如果溶液量多可分多次加入。 向吸附柱中加入600μL漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。 向吸附柱中加入600μL漂洗液，12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。 12000rpm離心2min，將吸附柱敞口置于室溫或50℃溫箱放置數分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，否則漂洗液中的乙醇會影響后續的實驗如酶切、PCR等。 將吸附柱放入一個干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加50～200μL經65℃水浴預熱的洗脫液，室溫放置2min，12000rpm離心1min。 為了增加質粒的回收效率，可將得到的洗脫液重新加入吸附柱中，室溫放置2min，12000rpm離心1min。 |
使用方法：本產品僅用于科研
注意：標本采集人員需按有關規定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發病的3天采集。
在安全柜內將本產品分裝到自備的、螺旋蓋內有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內鼻腭處，停留片刻后緩慢轉動退出。以同一拭子拭兩側鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內密封；每袋裝一份標本。同時也將標本有關信息填在標本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內，擰緊蓋，在容器上標明有關信息。同一患者2份以上的密封標本，可以放在同一個二級容器內。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內襯具吸水和緩沖能力的物質。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(或疫苗運輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質填充，并密封，由專人(2人)運送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內送達，則應盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯系遞送標本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
載玻片細胞CASPASE-3蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒
冰凍切片組織CASPASE-3蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒
石蠟切片組織CASPASE-3蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒
細胞CASPASE-3蛋白表達比色法定量檢測試劑盒
細胞CASPASE-3蛋白表達熒光定量檢測試劑盒
小鼠膜聯蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISAKit Fenofibric acid 酸 分子式：C17H15ClO4 度：98.0%
小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)elisa Fenticonazole nitrate 中文名：硝酸芬替康唑 分子式：C24H21Cl2N3O4S
小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISAKit Cefquinome 84957-30-2 中文名：喹咪 分子式：C23H24N6O5S2
小鼠細胞表面抗原分子CD8+ 英文名稱： Mouse Cluster of Differeiation 8+ 規格： 48T/96T 英文縮寫： CD8+ Fenbendazole 中文名：芬苯達唑 分子式：C15H13N3O2S 度：98.0%
小鼠細胞表面抗原分子CD4+ 英文名稱： Mouse Cluster of Differeiation 4+ 規格： 48T/96T 英文縮寫： CD4+ Dehydroadynerigenin glucosyldigitaloside 144223-70-1 中文名： 分子式：C36H52O13
去內毒素質粒小量提取試劑盒(1～5mL)靈芝烯酸F HPLC≥98% 20mg 蛋白質轉印印跡膜萘酚藍黑(NBB)染色試劑盒20
靈芝烯酸H HPLC≥98% 20mg RatNeuroophin4,-4elisa大鼠神經營養因子4(-4)elisa規格：96T/48T
靈芝酮A HPLC≥98% 20mg 小鼠纖溶酶原激活物抑制因子2(PAI2)elisa ，英文名： PAI2 ELISA Kit
靈芝醛A HPLC≥98% 20mg 兔熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA檢測試劑盒RabbitHeatShockProtein20,HSP-20ELISAKit 96T/48T
乙酰紫草素 HPLC≥98% 20mg 牛胰島素樣生長因子結合蛋白2(IGFBP-2)試劑盒 Bovine Insulin-like growth factor binding protein 2,IGFBP-2 ELISA kit
HPLC≥98% 20mg 英文名稱HumanIgAELISAKit人球蛋白A(IgA)規格：96T/48T
茵陳色原酮 HPLC≥98% 20mg 蛋類L-乳酸比色法定量檢測試劑盒20
長春質堿 HPLC≥98% 20mg Ratneuophilactivatingprotein-2,NAP-2elisa大鼠中性粒細胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)elisa規格：96T/48T
A HPLC≥98% 20mg 小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)elisa ，英文名： PAI-1 ELISA Kit
丹參新醌B HPLC≥98% 20mg 小鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA檢測試劑盒Mouseinsulinaoaibodies,IAAELISAKit 96T/48T
