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Human TIE-2 ELISA Kit

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品       牌

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更新時間:2018-05-16 11:12:43瀏覽次數:196次

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產品簡介

Human TIE-2 ELISA Kit
規格: 96T
檢測范圍: 156pg/ml→10ng/ml。
特異性: 系統和人 TIE1 的交叉反應<0.1%。
敏感性: <5pg/ml
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細胞裂解液、細胞培養上清

詳細介紹

Human TIE-2 ELISA Kit
規格: 96T
檢測范圍: 156pg/ml→10ng/ml。
特異性: 系統和人 TIE1 的交叉反應<0.1%。
敏感性: <5pg/ml
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細胞裂解液、細胞培養上清
Human TIE-2 ELISA Kit工作原理
Tie-1(tyrosine kinase with Ig and EGF homology domains 1)和 TIE-2/TTek,幾乎都在內皮細胞表達。
這一受體有個*的細胞外區,包括 2 個類似免疫球蛋白的環,被 3 個 EGF 類似序列分開,并
連接 3 型纖維連接蛋白類似序列和細胞內酪氨酸激酶區。人的 TIE-2 的前體有 1124 個氨基酸,
18 個氨基酸的引導肽,細胞外 727 個氨基酸,細胞內 354 個氨基酸。本試劑盒所用標準品為重
組人 TIE-2 的細胞外部分。
所提供的人 TIE-2 ELISA Kit 是典型的夾心法酶聯免疫吸附測定試劑盒(Enzyme
Linked-Immuno-Sorbent Assay, ELISA)。預先包被的抗體和檢測相抗體都是近 100%純度的親和純
化多克隆抗體。檢測相抗體經生物素(biotin)標記。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔
反應后,PBS 或 TBS 洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經過 PBS 或 TBS 的*洗
滌后用底物 TMB 顯色。TMB 在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的
黃色。顏色的深淺和樣品中的 TIE-2 呈正相關。

內容

規格

數量

預包被抗TIE-2 抗體的 96 孔板

96T

1

凍干標準品

10ng/管

2

生物素標記

130ul

1

親和素-過氧化物酶復合物

130ul

1

樣品稀釋液

30ml

1

抗體稀釋液

12ml

1

ABC 稀釋液

12ml

1

TMB 顯色液

10ml

1

TMB 終止液

10ml

1

洗滌緩沖液(25X)

20ml

1

封板膜

 

2

說明書

 

1

需要而未提供的試劑和器材

1. 標準規格酶標儀。

2. 自動洗板機。

3. 恒溫箱

4. 系列可調節移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器。

5. 干凈的試管和 Eppendof 管。

6. 用去離子水將 25X 洗滌緩沖液稀釋 25 倍,成 1X 洗滌緩沖液。

注意事項

1. 使用前 TMB 顯色液應為無色透明溶液,若發現顏色異常,請及時與廠家。

2. 用戶在初次使用試劑盒時,應將各種試劑管離心數分鐘,以便試劑集中到管底。

3 要嚴格避免操作過程中酶標板干燥。干燥會使酶標板上生物成份迅速失活。

4. 為免交叉污染,要避免重復使用手中的吸頭和試管。

5. 禁止混用不同批次試劑盒內的試劑。

6. 本公司提供的 96 孔酶標板是單條可拆型酶標板,用戶可按需求使用;剩余的酶標板請

 按保存條件貯存。

7. 揭封板膜和覆蓋封板膜時應避免用力過大導致液體濺出。

洗板方法

手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將 1X 洗滌緩沖液至少 300ul 注入孔內,浸泡 1-2 分鐘。根據需要,重復此過程數次。

自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

樣品的準備和保存

樣品如果不立即分析,應分裝后冷凍保存,且避免反復凍融。

細胞培養上清——離心去除沉淀,立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

血清——用干凈試管收集血液,室溫凝固 30 分鐘,離心 1500×g 15 分鐘,收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

血漿—在冰塊上收集肝素或 EDTA 抗凝血,抽血后 30 分鐘內離心 1500×g 15 分鐘。血漿在 2-8℃進一步離心 10000×g 10 分鐘,以*清除血小板。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

細胞裂解液——對于貼壁細胞,去除培養液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍。加入適量裂解液,用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常 10 秒后,細胞就會被裂解。對于懸浮細胞,離心收集細胞,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍。加入適量裂解液,用槍吹打把細胞吹散,用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后,10000—14000g 離心 3-5 分鐘,取上清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

樣品稀釋的一般原則

用戶須估計樣品待測因子的含量,決定適當的稀釋倍數,以使稀釋后樣品中待測因子的濃度處于ELISA 試劑盒的*檢測范圍。根據待測因子含量高、中、低的不同,分別采取不同的

稀釋方案:

高——指待測因子在 20-200ng/ml。一般按 1:100 稀釋。297ul 樣品稀釋液加 3ul 樣品。

中——指待測因子在 2-20ng/ml。一般按 1:10 稀釋。225ul 樣品稀釋液加 25ul 樣品。

低——指待測因子在 31.2-2000pg/ml。按 1:2 稀釋。100ul 樣品稀釋液加 100ul 樣品。

特低——指待測因子≤31.2pg/ml。樣品一般不做稀釋,或按 1:2 稀釋。

操作程序總結:

1. 加樣品和標準品,37℃反應 90 分鐘。不洗。

2. 加生物素標記抗體,37℃反應 60 分鐘。1X 洗滌緩沖液洗滌 3 次。

3. 加 ABC,37℃反應 30 分鐘。1X 洗滌緩沖液洗滌 5 次。

4. TMB37℃反應 15-20 分鐘。

5. 加入 TMB 終止液,讀數。

小鼠 頂體酶 ACE acrosome enzyme

小鼠 DNA甲基化轉移酶 DNMT DNA methyltransferase

小鼠 溶血素 HMN hemolysin

小鼠 20-羥化二十碳四烯酸 20-HETE 15-hydroeicosatetraenoic acid

小鼠 谷胱甘肽S轉移酶Mu5 GSTM5 glutathione S-transferase Mu5

小鼠 谷胱甘肽過氧化酶1 GSH-1 Glutathione peroxidase 1

小鼠 谷胱甘肽過氧化酶4 GSH-4 Glutathione peroxidase 4

小鼠 谷胱甘肽過氧化酶5 GSH-5 Glutathione peroxidase 5

小鼠 維生素D結合蛋白 DBP Vitamin D-binding protein

小鼠 抗透明帶子結合蛋白3抗體 Anti-ZP3 Ab Anti-zona pellucida-3 protein Antibody

小鼠 血清白蛋白 ALB Serum albumin

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