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Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤細胞(STR鑒定)

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更新時間:2018-05-28 13:17:16瀏覽次數:351次

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產品簡介

Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤細胞(STR鑒定)該細胞是由綿羊紅細胞免疫的BALB/c小鼠脾細胞和P3X63Ag8骨髓瘤細胞融合得到的。該細胞不分泌免疫球蛋白,對20 μg/ml的8-氮鳥嘌呤有抗性,對HAT比較敏感;該細胞可以作為細胞融合時的B細胞組分用于制備雜交瘤;鼠痘病毒陰性。
英文名稱:Mouse Myeloma Cells

詳細介紹

Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤細胞(STR鑒定)
英文名稱:Mouse Myeloma Cells
規格:1*10 6  
細胞介紹
該細胞是由綿羊紅細胞免疫的BALB/c小鼠脾細胞和P3X63Ag8骨髓瘤細胞融合得到的。該細胞不分泌免疫球蛋白,對20 μg/ml的8-氮鳥嘌呤有抗性,對HAT比較敏感;該細胞可以作為細胞融合時的B細胞組分用于制備雜交瘤;鼠痘病毒陰性。
一、細胞特性
1) 來源:骨髓瘤
2) 形態:淋巴母細胞樣,圓形,懸浮生長,不要用力吹打(生長時會沉到瓶底)
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
二、細胞收到后處理
Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤細胞(STR鑒定)
在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿*培養液并封好瓶口是細胞運輸的辦法。收到細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內,嚴格無菌操作。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的*培養液移入廢液缸中,原瓶(T25瓶)保留6-8ml*培養液,懸浮細胞需離心處理,放入37℃、5%CO2孵箱培養;超過80%匯合度時,根據情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養步驟。
三、細胞培養步驟
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中,加入約6ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
2、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集,1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,進行離心收集,1000RPM條件下離心5分鐘,去除上清,按凍存數量加入血清及DMSO,凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
出現問題,可重發的情況有哪些?判定標準是什么?
(1)細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發;

  1. 凍存的細胞復蘇后,絕大多數細胞未存活,重發;
  2. 存活的細胞靜置24小時后,絕大多數細胞未存活,重發;
  3. 凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,出現污染,重發;
  4. 視具體情況而定。

 ★ 注:如運輸過程中導致細胞污染或者死亡,我們將無條件補發 收貨后十個工作日內有其他問題提供照片可半價重發。

相關細胞系列表:

Human 人神經膠質瘤細胞;H4

Human 人肺腺癌細胞;NCI-H1299

Human 人類B細胞淋巴癌細胞;Granta-519

Human 人胚腎上皮包裝細胞;GP2-293

Human 人卵巢癌細胞;ES-2

Human 人食管癌細胞;ECA109

Human 人食管癌細胞;EC9706

Human 人臍靜脈融合細胞;EA.hy926

Human 人前列腺癌細胞;DU 145

Human 人結直腸腺癌上皮細胞;DLD-1

Human 人Burkkit淋巴瘤細胞;Daudi

Human 人視網膜色素上皮細胞;D407

關鍵詞:培養箱 顯微鏡

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