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上海聯邁生物工程有限公司
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BALB/3T3 clone A31小鼠胚胎成纖維細胞BALB/3T3 clone A31是1968年S.A. Aaronson和G.T. Todaro從裂解的14到17天的 BALB/c小鼠胚胎中建立的幾株細胞之一。細胞分裂對接觸抑制特別敏感，生長需高倍數稀釋，飽和濃度低，對癌基因DNA毒SV40和小鼠肉瘤毒高度易
英文名稱:Mouse Embryonic Fibroblasts Cells
BALB/3T3 clone A31小鼠胚胎成纖維細胞
英文名稱：Mouse Embryonic Fibroblasts Cells
規格：1*10 6
細胞介紹
BALB/3T3 clone A31是1968年S.A. Aaronson和G.T. Todaro從裂解的14到17天的 BALB/c小鼠胚胎中建立的幾株細胞之一。細胞分裂對接觸抑制特別敏感，生長需高倍數稀釋，飽和濃度低，對癌基DNA毒SV40和小鼠肉瘤毒高度易感。
一、細胞特性
1） 來源：小鼠胚胎，品系：BALB/c
2） 形態：成纖維細胞，貼壁生長
3） 含量：>1x106 個/mL
4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
二、細胞收到后處理
BALB/3T3 clone A31小鼠胚胎成纖維細胞在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿*培養液并封好瓶口是細胞運輸的辦法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的*培養液移入廢液缸中，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培養液，懸浮細胞需離心處理，放入37℃、5%CO2孵箱培養；超過80%匯合度時，根據情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養步驟。
三、細胞培養步驟
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中，加入約6ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
2、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集，1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，進行離心收集，1000RPM條件下離心5分鐘，去除上清，按凍存數量加入血清及DMSO，凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
出現問題，可重發的情況有哪些？判定標準是什么？
（1）細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失、破損、漏液等，重發；
★ 注：如運輸過程中導致細胞污染或者死亡，我們將無條件補發 收貨后十個工作日內有其他問題提供照片可半價重發。
相關細胞系列表：
GM12878 ；人B淋巴細胞 1×10^6 cells/瓶
Tcam-2 ；精原細胞瘤細胞 1×10^6 cells/瓶
RT112(RT-112);人膀胱移形癌細胞 1×10^6 cells/瓶
QGY7703(QGY-7703);人肝癌細胞 1×10^6 cells/瓶
OVISE ；人卵巢癌細胞 1×10^6 cells/瓶
TPC-1(TPC1) ;人瘤狀甲狀腺癌細胞? 1×10^6 cells/瓶
FHs 74 Int(FHs74Int)；人小腸正常細胞 1×10^6 cells/瓶
UACC-812(UACC812)；人乳腺導管瘤細胞 1×10^6 cells/瓶
AU-565(AU565) ；人乳腺癌細胞 1×10^6 cells/瓶
TFK-1;人膽管癌細胞 1×10^6 cells/瓶
BEAS-2B ；人正常肺上皮細胞 1×10^6 cells/瓶
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