FITC-PEG-Cholesterol熒光素聚乙二醇* 分子生物試劑
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磁珠血液DNAout本試劑盒是利用磁珠的方法提取全血基因組DNA的產品 ,適用于從人類及哺乳動物新鮮或凍藏的抗凝血樣品中提取基因組DNA。同時也可用于從血清、血清黃層、體液以及培養細胞中提取高純度的DNA。血液樣品經裂解液處理后,DNA吸附在磁珠的表面。在外加磁場的作用下,使DNA與其他物質分離。它具有下列特點:
1. 快速簡捷,提取過程無需離心,一般可在36分鐘內完成。
磁珠血液DNAout
名稱 | 規格 | 價格 | 手冊 |
磁珠血液DNAout | 100次 | 詢價 |
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本試劑盒是利用磁珠的方法提取全血基因組DNA的產品 ,適用于從人類及哺乳c
動物新鮮或凍藏的抗凝血樣品中提取基因組DNA。同時也可用于從血清、血清黃層、
體液以及培養細胞中提取高純度的DNA。血液樣品經裂解液處理后,DNA吸附在磁
珠的表面。在外加磁場的作用下,使DNA與其他物質分離。它具有下列特點:
1. 快速簡捷,提取過程無需離心,一般可在36分鐘內完成。
2. 所得DNA純度高,OD260/OD280一般達1.7-1.9,可直接用于PCR、Southern-blot和各種酶切反應。
3. 操作過程中不接觸,酚等有毒物質。
4. 對于100μl 全血樣本,足夠使用100次;對于1ml全血樣本,足夠用10次。
5. 性價比高,質量與進口試劑盒相當,但價格更便宜。
6. 除適用于手工操作外,亦可配合國內外各類磁棒式核酸提取儀或核酸提取工作站使用。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離,當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時,變性的質粒DNA又恢復原來的構型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構,通過離心,染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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