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凋亡DNAout

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更新時間:2018-06-11 20:51:55瀏覽次數:217次

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產品簡介

凋亡DNAout細胞凋亡(Apoptosis)是生命個體中的調控基因為了維持個體生命,調控細胞進行新陳代謝,促使不需要的細胞或者具有危險性的細胞自我凋亡的現象,與細胞的發生、分化、生理現象(特別在免疫方面)有著密切關系。細胞凋亡時,染色體DNA以核小體為單位(185 bp)進行DNA片斷化產生DNA Ladder,這些被片斷化了的DNA片段,可以使用電泳的方法進行檢出。本試劑盒能夠從培養細

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凋亡DNAout

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凋亡DNAout

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細胞凋亡(Apoptosis)是生命個體中的調控基因為了維持個體生命,調控細胞進行新陳代謝,促使不需要的細胞或者具有危險性的細胞自我凋亡的現象,與細胞的發生、分化、生理現象(特別在免疫方面)有著密切關系。細胞凋亡時,染色體DNA以核小體為單位(185 bp)進行DNA片斷化產生DNA Ladder,這些被片斷化了的DNA片段,可以使用電泳的方法進行檢出。本試劑盒能夠從培養細胞中選擇性地提取片斷化DNA,能夠大限度地抑制起妨礙作用的完整的染色體DNA的混入,并可以通過電泳法進行高效檢出。具有下列特點:
1. 操作簡便:使用Ready-to-Use型試劑。
2. 高靈敏度:能夠高靈敏度地檢出凋亡細胞的片斷化DNA。
3. 高特異性:抑制完整的染色體DNA的混入,選擇性地提取斷片化DNA。
4. 快速操作:整體操作約需2.5小時。
5. 定 量 性: 與熒光色素組合可以對片斷化DNA進行定量。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離,當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時,變性的質粒DNA又恢復原來的構型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構,通過離心,染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
相關產品列表:
Phosphate Buffer,0.5M, pH7.6  
Phosphate Buffer,0.5M, pH8.0  
Phosphate Buffer,0.5M, pH8.5 
Phosphate Buffer,0.5M, pH9.0 
Phosphate Buffer,0.5M, pH9.5 
Phosphate Buffered RIPA 
Phosphate Buffered RIPA with Glycerol,2X
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