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上海聯邁生物工程有限公司
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柱式質粒 DNAout本試劑盒是用于質粒DNA小量制備與純化的試劑盒。菌體先經堿裂解法處理，再通過離心吸附柱，專一結合DNA，后洗去雜質，高效快速提取質粒DNA，全套操作可以在30分鐘之內完成。使用本試劑盒可從1-5 mL過夜培養的菌液純化得到高達20 μg的高純度質粒DNA（OD260/OD280 = 1.8-2.0），可以直接用于酶切、轉化、測序及PCR等。
1. 快速、步驟少，整個操作在半
柱式質粒 DNAout
名稱 | 規格 | 價格 | 手冊 |
柱式質粒 DNAout | 100次 | 290元 |
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本試劑盒是用于質粒DNA小量制備與純化的試劑盒。菌體先經堿裂解法處理，再通過離心吸附柱，專一結合DNA，后洗去雜質，高效快速提取質粒DNA，全套操作可以在30分鐘之內完成。使用本試劑盒可從1-5 mL過夜培養的菌液純化得到高達20 μg的高純度質粒DNA(OD260/OD280 = 1.8-2.0)，可以直接用于酶切、轉化、測序及PCR等。
1. 快速、步驟少，整個操作在半個小時之內完成。
2. 不需要預平衡離心吸附柱。
3. 洗柱液即開即用，不需要額外加乙醇。
4. 純度高，采用本試劑盒提取的質粒OD比值在1.8-2.0之間。
5. 產量高，每毫升過夜培養的細菌可以提取到2-5 μg/mL。
6. 用途廣，適用于低拷貝和高拷貝質粒。
7. 價格低，比多數國內同類產品的價格更便宜。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時，變性的質粒DNA又恢復原來的構型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構，通過離心，染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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