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上海聯邁生物工程有限公司
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大提無內毒素質粒DNAout本產品是整合LMAI Bio經典法大提質粒DNAOUT(CAT#:80912)和菌體內毒素清除劑(CAT#:90901)兩個產品而成。用本產品提取的質粒DNA,內毒素的污染濃度低,適合于轉染等對內毒素的污染敏感的實驗。此產品的特點是:
1. *的先去除菌體的內毒素再提質粒DNA策略,*避免了內毒素對DNA的污染。
2. 去內毒素效果好,處理一次可以去除99%以上的內
大提無內毒素質粒DNAout
名稱 | 規格 | 價格 | 手冊 |
大提無內毒素質粒DNAout | 5次 | 390元 |
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本產品是整合LMAI Bio經典法大提質粒DNAOUT(CAT#:80912)和菌體內毒素清除劑(CAT#:90901)兩個產品而成。用本產品提取的質粒DNA,內毒素的污染濃度低,適合于轉染等對內毒素的污染敏感的實驗。此產品的特點是:
1. *的先去除菌體的內毒素再提質粒DNA策略,*避免了內毒素對DNA的污染。
2. 去內毒素效果好,處理一次可以去除99%以上的內毒素。
3. 使用靈活,質粒大量提取和內毒素清除兩個產品操作相互可以單獨使用。
4. 處理量大,一次可從50-100 mL過夜培養的菌液純化得到高達300-500 μg的高拷貝質粒DNA(低拷貝質粒則產率降低)。
5. 得到的質粒DNA可以直接用于轉染等實驗。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離,當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時,變性的質粒DNA又恢復原來的構型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構,通過離心,染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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