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上海聯邁生物工程有限公司
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液相內毒素清除劑去除液體生物樣品（包括質粒DNA樣品）中污染的內毒素（endotoxin）具有重要的臨床意義，因為內毒素對原代細胞、傳代細胞和整體動物均具有顯著的毒性作用。由于內毒素（化學本質為脂多糖，即lipopolysaccharides）是包括E.coli在內的革蘭氏陰性細菌細胞壁的主要組成成分，并且帶電性跟DNA類似，所以從E.coli細胞中提取的質粒DNA和重組蛋白質藥物中常常含有大量的
液相內毒素清除劑
名稱 | 規格 | 價格 | 手冊 |
液相內毒素清除劑 | 100次 | 390元 |
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去除液體生物樣品（包括質粒DNA樣品）中污染的內毒素（endotoxin）具有重要的臨床意義，因為內毒素對原代細胞、傳代細胞和整體動物均具有顯著的毒性作用。由于內毒素（化學本質為脂多糖，即lipopolysaccharides）是包括E.coli在內的革蘭氏陰性細菌細胞壁的主要組成成分，并且帶電性跟DNA類似，所以從E.coli細胞中提取的質粒DNA和重組蛋白質藥物中常常含有大量的內毒素污染，并且很難用用常規方法（包括硅膠膜吸附，離子交換吸附、凝膠排阻過濾、氯化銫超速離心）去除。本產品就是專門用于高效去除生物樣品中的內毒素污染。
1. 簡單快速，一次處理只需要20分鐘左右，不需要復雜儀器設備。
2. 高效，一次處理可以去除90%以上的內毒素，經過三次重復抽提可將內毒素的水平降低到0.2 EU（endotoxin unit，約0.1 ng LPS）/mL以下。
3. 適用范圍廣，可用于DNA、RNA、蛋白質或其他生物樣品。
4. 不影響DNA和絕大部分蛋白質的活性，處理過的質粒DNA可用于轉染實驗。
5. 既可小規模使用（在1.5 mL離心管內），也可放量使用。
6. 用本產品處理質粒DNA后DNA回收率為50%。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時，變性的質粒DNA又恢復原來的構型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構，通過離心，染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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