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超快核酸銀染試劑盒核酸銀染的原理是銀離子(Ag+)可與核酸形成穩定的復合物,然后用還原劑如甲醛在堿性環境下使Ag+還原成銀顆粒,可把核酸電泳帶染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝膠電泳染色,也用于瓊脂糖凝膠染色,其靈敏度比EB高200倍,常用于檢測SSR標記、SNP標記。但常規的銀染方法由固定、氧化、染色、顯影、終止等步驟組成,操作十分繁瑣,尤其不適用于大批量實驗。為解決此問題,本公司推出本產品,其
超快核酸銀染試劑盒
名稱 | 規格 | 價格 | 手冊 |
超快核酸銀染試劑盒 | 1000mL | 1290元 |
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核酸銀染的原理是銀離子(Ag+)可與核酸形成穩定的復合物,然后用還原劑如甲醛在堿性環境下使Ag+還原成銀顆粒,可把核酸電泳帶染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝膠電泳染色,也用于瓊脂糖凝膠染色,其靈敏度比EB高200倍,常用于檢測SSR標記、SNP標記。但常規的銀染方法由固定、氧化、染色、顯影、終止等步驟組成,操作十分繁瑣,尤其不適用于大批量實驗。為解決此問題,本公司推出本產品,其特點如下:
1. 超快,整個過程只需要20分鐘。
2. 操作簡單,只有染色和顯影兩步。
3. 靈敏度跟常規方法相當,EB高200倍,能檢測到10ng的DNA條帶。
4. 可以用于檢測10 nt以上的DNA Oligo或RNA Oligo,所以可以用于miRNA的PAGE電泳。
5. 兩個成分都是現用現配,可重復性好。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離,當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時,變性的質粒DNA又恢復原來的構型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構,通過離心,染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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