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即用型高保真PCR試劑盒

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更新時間：2018-06-13 14:24:05瀏覽次數：294次

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產品簡介

即用型高保真PCR試劑盒本產品是即用型的高保真PCR試劑盒，含有除引物、模板以外的所有高保真PCR試劑，包括Pfu DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR增強劑、上樣染料等，特別適合于高保真PCR反應。
1. 高保真：所含Pfu DNA聚合酶是使用較廣泛的高保真酶，其保真度為普通Taq酶的10倍。

詳細介紹

即用型高保真PCR試劑盒

名稱	規格	價格	手冊
即用型高保真PCR試劑盒	11.5 mL	150元

本產品是即用型的高保真PCR試劑盒，含有除引物、模板以外的所有高保真PCR試劑，包括Pfu DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR增強劑、上樣染料等，特別適合于高保真PCR反應。

1. 高保真：所含Pfu DNA聚合酶是使用廣泛的高保真酶，其保真度為普通Taq酶的10倍。

2. 使用時只需在加入模板和引物并稀釋到1倍濃度即可進行PCR反應，非常方便，簡化了高保真PCR的準備工作。

3. 高保真PCR反應所必需試劑全集于一管之中，數分鐘即可完成反應體系配置。由于加樣過程少，有利于減少污染，降低實驗誤差。

4. 由于各成分的濃度和比例都經過精心優化，反應的靈敏度高，特異性強。

5. 可用于基因的高保真擴增和基因定點突變等實驗，得到的高保真PCR產物可用于平末端克隆。

RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時，變性的質粒DNA又恢復原來的構型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構，通過離心，染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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