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BCA法蛋白定量試劑盒

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更新時間:2018-06-15 14:49:53瀏覽次數:256次

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產品簡介

BCA法蛋白定量試劑盒本產品是基于BCA法(bicinchoninic acid,二奎啉甲酸法)蛋白檢測原理開發的蛋白質濃度測定產品,BCA法跟Lowry法的*步*相同,就是在堿性條件下,藍色的Cu2+被蛋白質還原成紫色的Cu+。此反應類似Cu2+與Biuret(NH2-CO-NH-CO-NH2,雙縮脲)發生的反應,故又叫Biuret反應(Biuret反應本身就可以測定蛋白質濃度,目前仍然是醫

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BCA法蛋白定量試劑盒

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BCA法蛋白定量試劑盒

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390元

 

本產品是基于BCA法(bicinchoninic acid,二奎啉甲酸法)蛋白檢測原理開發的蛋白質濃度測定產品,BCA法跟Lowry法的*步*相同,就是在堿性條件下,藍色的Cu2+被蛋白質還原成紫色的Cu+。此反應類似Cu2+與Biuret(NH2-CO-NH-CO-NH2,雙縮脲)發生的反應,故又叫Biuret反應(Biuret反應本身就可以測定蛋白質濃度,目前仍然是醫院血液蛋白定量的方法)。第二步,Cu+與BCA發生反應形成水溶性的紫色化合物,通過分光在562 nm處測定紫色化合物的量就可以精確定量蛋白質濃度,增加BCA反應這一步的原因是BCA檢測靈敏度比Biuret反應高100倍左右。

1. 對大多數離子型和非離子型去污劑不敏感,但對Cu的還原劑和螯合劑敏感。

2. 比Lowry法更加簡單快捷,45分鐘內完成測定。

3. 試劑穩定,室溫可以放置兩年,工作液1天內有效。

4. 線性范圍在 20-2000  μg/mL(對BSA)。

5. 小測量體積為1-20 μL。低測量蛋白量為5  μg/mL。

6. 終產物穩定,檢測不同蛋白質分子的變異系數遠小于考馬斯亮藍法蛋白定量。

7. 短可以檢測雙肽,所以適合于分子量較小的蛋白質,而Bradford法需要一定大小的蛋白質。

8. 有常規(普通試管)和微量(96孔板)兩種檢測模式。

RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離,當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時,變性的質粒DNA又恢復原來的構型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構,通過離心,染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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