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白介素elisa試劑盒實驗測定方法與注意事項

2021-8-18  閱讀(2687)

白介素elisa試劑盒實驗測定方法:

1、定性測定

(1)陽性判定值法(cut-off value,CO值):一般為陰性對照的平均A值加一個常數,試劑制備嚴格標準化,要先計算出陽性對照A值平均數和陰性對照A值平均數。標本A值≥CO值即為陽性。
(2)抑制率法:在競爭抑制法中結果可用抑制率表示。
抑制率(%)=(A陰性對照A- A待測)/陰性對照X100%,一般以抑制率≥50%為陽性
2、半定量測定  
結果一般以滴度表示。將標本連續稀釋后,進行ELISA檢測,在陽性臨界值以上的zui高稀釋度即為該標本的“滴度"。
3、定量測定  
即用己知量的標準品作一系列稀釋后進行ELISA測定,與待測標本同時進行測定,繪制標準曲線,結果以絕對量或活性單位表示。

二、注意事項:

1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最hao控制在5分鐘內,如標本數量多,使用排槍加樣。

4. 請每次測定的同時做標準曲線,最hao做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴格按照小鼠卵泡抑素樣蛋白3(FSTL3) ELISA試劑盒說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

 




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