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上海博湖生物科技有限公司
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同型半ELISA檢測試劑盒的操作要點和試劑準備
2018-11-29 閱讀(181)
| 提 供 商 | 上海博湖生物科技有限公司 | 資料大小 | 13.5KB |
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| 資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數(shù) | 181次 |
同型半(Hcy)elisa檢測試劑盒的操作要點:
1）標本的采取和保存：可用作ELISA測定的標本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定（如血清、尿液），有些則需經(jīng)預處理（如糞便和某些分泌物）。大部分ELISA檢測均以血清為標本；
2）試劑的準備：所需試劑、蒸餾水、去離子水、自配的緩沖液；
3）加樣：一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結(jié)合物，加底物。
4）保溫：ELISA中一般有兩次抗原抗體反應，即加標本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間，這一保溫過程稱為溫育。
5）洗滌：洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外，手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6）顯色和比色：顯色是ELISA中的后一步溫育反應，此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。比色前應先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體，然后將板正確放入酶標比色儀的比色架中。儀器準備為酶標儀。
7）結(jié)果判斷：分定性判定和定量判定。
同型半(Hcy)elisa檢測試劑盒試劑準備：
1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品)：每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管，每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進行30倍稀釋。
