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產品及特點

Y 染色體上 95%是男性特異區域，里面含和男性有關的基因。SRY 基因

（Sex-determining Region on Y Chromosome ，SRY），雄性的性別決定基因，指 Y 染色體上具體決定生物雄性性別的基因片段。人的 SRY 基因位于 Yp11.3，只含有一個外顯子，沒有內含子，轉錄單位長約 1.1kb，編碼一個 204 氨基酸的蛋白質。本產品是根據 PCR 原理開發，它具有下列特點：

• 即開即用，用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經過精心優化，專一性強，只擴增 SRY 基因。

3. 提供陽性對照，便于區分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

規格及成分

成 份

編號

十孔盒包裝

PCR MagicMix 3.0

90805

1 mL（紅蓋）

超純水

100935

1 mL（亮黃色）

人 Y 染色體性別決定區

（SRY）PCR 引物混合液

13-190901yw

100 μL（白蓋）

人 Y 染色體性別決定區

（SRY）PCR 陽性對照

（1×10E8 拷貝/μL）

60908-190901pc

50 μL（黃蓋）

使用手冊

13-190901sc

1 份

運輸及保存

低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其

他試劑。

自備試劑

樣品 DNA。

使用方法

一、樣品 DNA 的制備

• 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數核酸提取試劑盒兼容。
• 如果有 N 個樣品，則需要做 N+2 個提取，包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加 10μL 人 Y 染色體性別決定區（SRY）PCR 陽性對照的 100 倍稀釋液而得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。

二、設置PCR 反應（40μL 體系）

• 對 N+2 個樣品，在PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性對照，故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個PCR 管中分別加入下列成分：

成分

N+2 個

樣品管

PCR 陰性

對照

PCR 陽性

對照

PCR Magic Mix 3.0

各 20 μL

20 μL

20 μL

人 Y 染色體性別決定區

（SRY）PCR 引物混合液

各 2 μL

2 μL

2 μL

N+2 個樣品 DNA 模板

各 18 μL

-

-

PCR 陰性對照（水）

-

18 μL

-

PCR 陽性對照（人 Y 染色體性別決定區（SRY） PCR 陽性對照的 100 倍

稀釋液）

-

-

18 μL

4. 按下表設置 PCR 反應：

三、電泳檢測

• 取 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix 在擴增結束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產物陽性對照必須有 232bp 大小的條帶出現，陰性對照必須無任何擴增，否則實驗無效。對沒有擴增產物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除PCR 抑制劑的感染。

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