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上海雅吉生物科技有限公司
主營產品： 培養原代細胞,細胞系價格,耐藥細胞株,實時熒光pcr試劑盒 |
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RIPA裂解液（強）
| 參考價 | ￥ 226 |
| 訂貨量 | 1 |
具體成交價以合同協議為準
- 型號
- 品牌
- 廠商性質 生產商
- 所在地 上海市
更新時間：2019-07-24 13:51:44瀏覽次數：532
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- RIPA裂解液(強)使用方法:
對于培養細胞樣品：
1. 取適當量的 RIPA 裂解液混勻，在使用前數分鐘內加入 PMSF（貨號 WB0114），使 PMSF 的終
濃度為 1mM。
2. 對于貼壁細胞，去除培養液用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍，加入適量裂解液，用槍吹打
數下，使裂解液和細胞充分接觸，輕輕的搖晃約 5-10 分鐘，充分裂解后，10000-14000g 離心 10 分鐘，
取上清，即可進行后續操作。
裂解液用量說明： 用于不同規格標準培養板裂解液容量
板規格/表面積 試劑容量
100mm 500-1000μι
60mm 250-500μι
6-well plate 200-400μιper well
24-well plate 100-200μιper well
96-well plate 50-100μιper well
3. 對于懸浮細胞，離心收集細胞，用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍，加入適量裂解液，用槍
吹打把細胞吹散，用手指輕彈或旋渦震蕩 5-10 分鐘以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞
沉淀。如果細胞量較多，必需分裝然后再裂解，充分裂解后，10000-14000g 離心 10 分鐘，取上清，
即可進行后續操作。
RIPA裂解液(強)對于組織樣品：
1.手術切除的組織塊迅速置于預冷的生理鹽水中，漂洗數次，以清潔表面的血跡，將組織稱量后切成
幾個較小的組織塊放入組織勻漿器中。
2. 取適當量的 RIPA 裂解液混勻，在使用前數分鐘內加入 PMSF，使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按組織凈重（g）：裂解液(ml)=1：10 的比例，加入相應體積的裂解液進行勻漿(如果裂解不充分可
以適當添加更多的裂解液 如果需要高濃度的蛋白樣品 可以適當減少裂解液的用量) 。
4. 用勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3- 5 分鐘，取上清，即可進行后續作。
注：RIPA 裂解液的裂解產物中經常會出現一小團透明膠狀物，屬正常現象。該透明膠狀物為含有基
因組 DNA 等的復合物。
