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我們生產的紅細胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)，經過優化配方，用于裂解小鼠脾臟
等造血組織或者人外周血中懸浮細胞中的紅細胞。此溶液中主要有效成分為氯化銨。使在裂解紅細胞
的同時幾乎不損傷淋巴細胞或其它有細胞核的細胞。小鼠胸腺和淋巴結細胞不需要使用此裂解液。本
裂解液經過無菌過濾，處理過的血液或組織細胞樣品可以用于后續的原代培養、細胞融合以及核酸或
蛋白的提取及各種常規的分析和檢測。
對于組織細胞樣品：
1. 新鮮組織經過消化處理，通過適當方法分散成細胞懸液，收集小鼠脾細胞制備單細胞懸浮液。
2. 4°C 400-500xg 離心棄上清取沉淀。
3. 加入 3-5 倍細胞體積的，輕輕吹打混勻，在冰上裂解 4-5 分鐘，并且裂解過程
中宜適當偶爾搖動以促進紅細胞裂解。例如細胞沉淀的體積為 1ml，則加入 3-5ml 的紅細胞
裂解液。本步驟在室溫或 4 度操作均可。
4. 4°C 400-500xg 離心 5 分鐘，棄紅色上清。
5. 如果發現紅細胞裂解不*，可以重復上述步驟 3 和步驟 4 一次。通常極微量的紅細胞不會
影響后續的一些檢測。
6. 加入適量 PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液，重懸沉淀洗滌 1-2 次，4°C 400-500xg 離心
2-3 分鐘，棄上清。洗滌液的用量通常應至少為細胞沉淀體積的 5 倍。
7. 根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀后即可進行細胞計數，調節密度，進行下一步染色。
對于血液樣品：
1. 取新鮮抗凝血，4°C 400-500xg 離心 5 分鐘，離心棄上清。
2. 加入 6-10 倍細胞體積的，輕輕吹打混勻，在冰上裂解 4-5 分鐘，并且裂解過程
中宜適當偶爾搖動以促進紅細胞裂解。例如細胞沉淀的體積為 1ml，則加入 6-10ml 的紅細胞
裂解液。
3. 4°C 400-500xg 離心 5 分鐘，棄紅色上清。
4. 如果發現紅細胞裂解不*，可以重復上述步驟 2 和步驟 3 一次。通常極微量的紅細胞不會
影響后續的一些檢測。
5. 加入適量 PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液，重懸沉淀洗滌 1-2 次，4°C 400-500xg 離心
2-3 分鐘，棄上清。洗滌液的用量通常應至少為細胞沉淀體積的 5 倍。
6. 根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀后即可進行細胞計數，調節密度，進行下一步染色。
注意：對于微量或少量的血液樣品，可以在*步中不進行離心棄上清的操作，直接在第二步中加
入 10 倍血液體積的紅細胞裂解液，并在室溫或 4℃裂解 4-5 分鐘。對于鼠的血液，裂解 4-5
分鐘已經足夠，對于人的外周血，宜延長裂解時間至 10 分鐘，但通常不宜超過 15 分鐘，并
且裂解過程中宜適當偶爾搖動以促進紅細胞裂解。后續步驟相同。