技術文獻分享-ELISA試劑盒細節要求

　　◆ELISA需要遵循的幾個細節要點：

　　1、抗原或抗體能吸附于固相載體表面，并保持其免疫學活性;

　　2、抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物，而此種酶結合物仍能保持其免疫學和酶學活性;

　　3、酶結合物與相應抗原或抗體結合后，可根據加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在，而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的，可根據已知濃度的抗原或抗體的顏色反應的深淺繪制標準曲線并依此計算出未知樣品中抗體或抗原的濃度。

　　◆注意事項：

　　1、標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應。保存過久可發生聚合在ELISA中可使本底加深。

　　2、凍結標本溶解后，蛋白質局部濃縮，分布不均，應充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛混合，不要在混勻器上強烈震蕩。

　　3、渾濁或有沉淀的標本應先離心或過濾，澄清后再檢測。

　　4、反復凍融會使蛋白效價降低，所以代測樣本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。

　　除了以上內容，在ELISA試劑盒細節中，稀釋前、后的樣品必須充分混勻，所有試劑在加樣前也須搖勻，以保證試驗的均一性。

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