貨號 | 名稱 | 規格 | 價格 |
LX3032 | LysoTracker Green DND-26 溶酶體綠色熒光探針 | 50μl | 428 |
LX5242 | MitoTracker® Red CM-H2XRos線粒體紅色熒光探針 | 50µg | 428 |
LX6252 | MitoTracker® Red CMXRos 線粒體紅色熒光探針 | 50µg | 428 |
LX4232 | LysoSensor Yellow/Blue DND-160 溶酶體黃/藍色熒光探針 | 50μl | 428 |
LX5232 | LysoSensor™ Blue DND-167溶酶體藍色熒光探針 | 50μl | 428 |
LX2801 | iFluor™ 555 phalloidin iFluor™ 555標記鬼筆環肽(橘色) | 300T | 1857 |
LX3614 | ER-Tracker Red (BODIPY® TR Glibenclamide), for live-cell imaging內質網紅色熒光探針 | 20µl (1mM) | 1680 |
LX3616 | Golgi-Tracker Green (BODIPY® FL C5-Ceramide )高爾基體綠色熒光探針 | 1mg | 1680 |
LX3608 | MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator 線粒體超氧化物紅色熒光探針 | 50µg | 780 |
LX3620 | NBD C6-Ceramide for Golgi Staining 高爾基體綠色熒光探針 | 1mg | 1680 |
LX3622 | Golgi-Tracker Red (BODIPY™ TR Ceramide), for live-cell imaging 高爾基體紅色熒光探針 | 1mg | 1680 |
LX3610 | ER-Tracker Blue-White DPX, for live-cell imaging內質網藍色熒光探針(活細胞) | 50µl(1mM) | 648 |
ER-Tracker探針是一系列具有細胞膜透過性,對活細胞內質網具有高度選擇性的探針,不像傳統的DiOC6(3),該系列探針幾乎不對線粒體著色,且在較低濃度即可實現對內質網的染色,且對細胞幾乎無毒性。使用以下提供的優化步驟對活細胞染色后用醛固定,可以部分保留活細胞的染色特征。
使用方法
本實驗方案經牛肺動脈內皮細胞優化,且已被其他常規細胞系驗證。但不同的細胞類型其最佳使用條件不同,還需用戶根據該方案進行進一步優化。
1. 試劑準備
使用前將ER-Tracker Green (BODIPY® FL Glibenclamide)回溫至室溫,并簡短離心使該DMSO溶液至管底。
2. 細胞樣品處理及染色
2.1 將1mM ER-Tracker Green (BODIPY® FL Glibenclamide)儲存液按照實驗要求稀釋至工作濃度,推薦工作濃度為~1µM。建議在不影響實驗結果的前提下盡量使用較低濃度探針,以避免由于濃度過高染色導致的假象。
注:使用含Ca2+、Mg2+ Hank’s (HBSS/Ca/Mg)稀釋該探針進行染色,可得到最佳實驗結果。
2.2 染色
對于貼壁細胞,吸除培養皿中培養基,用HBSS清洗細胞,加入預熱的染料工作液于37℃孵育細胞15-30min。吸除染色液,加入不含探針的新鮮培養液,并在熒光顯微鏡下觀察細胞。
細胞如需固定,請參考以下步驟。
3.細胞固定
3.1 固定細胞:用4%甲醛于37℃固定細胞2min。
注:已染色細胞用醛固定后,僅部分ER-Tracker Green (BODIPY® FL Glibenclamide)留在細胞內,熒光信號會有部分衰減。
3.2 清洗觀察細胞:細胞固定后,可用合適緩沖液進行清洗,每次5min,共2次。清洗后可對細胞進行后續封片、鏡檢或進一步染色。
注:不建議對細胞進行透化處理,因為經Triton X-100透化后,無信號保留。