6
免疫原
klh偶聯合成肽:RRT*VKSTPQS，其中T*表示phospho-Thr
主機的兔子
單克隆多克隆
親和純化的血清在PBS, ph7,4
格式凍干
數量25µg
再加入25µl的無菌水
-20°C保存凍干/重組;一旦重組，使公平，以避免重復凍融循環，請記住，在打開之前，旋轉管短暫，以避免任何損失，凍干材料粘附在瓶蓋或管的兩側
Western blot (WB)
推薦稀釋倍數1:10 000 (WB)
預期|表觀MW
擬南芥為25 kDa
分別用3X LB (6 M尿素、12% SDS、30%甘油、100 mM DTT、150 mM Tris pH7.0、0.8% Comassie g -250)增溶1µg擬南芥野生型和突變體的類囊體膜。負載1µg總葉綠素，在16%的SDS-PAGE上進行分離，然后在硝化纖維素膜上印跡2 h。用奶粉封閉印跡2小時，然后在一抗溶液(AS13 2705, 1:5 000)中孵育2.5小時，然后換瓶，在TBST中洗滌3次，5分鐘。將二抗(兔IgG馬蘿卜過氧化物酶共軛)稀釋至1:10 000，孵育膜1小時，然后按上述步驟洗滌。所有的過渡步驟都是在室溫(RT)攪拌下進行的。根據制造商的說明，用ECL沖洗膜5分鐘，然后用富士膠片CCD相機記錄，增加時間為30秒，大約5分鐘
