免疫原

klh偶聯(lián)肽來源于擬南芥A12.2 (At3g25940)蛋白序列。這一序列僅在數(shù)據(jù)庫中的其他真核生物序列中是弱保守的。

主機(jī)的兔子

單克隆多克隆

親和純化的血清在PBS, ph7,4

格式凍干

數(shù)量200µg

復(fù)配時，加143µl無菌水

-20°C保存凍干/重組;一旦重組，使公平，以避免重復(fù)凍融循環(huán)，請記住，在打開之前，旋轉(zhuǎn)管短暫，以避免任何損失，凍干材料粘附在瓶蓋或管的兩側(cè)

Western blot (WB)

推薦稀釋倍數(shù)1:20 00 (WB)

預(yù)期|表觀MW 13,6 kDa

用PEB (AS08 300)提取擬南芥(1)和水稻(4)葉片的總蛋白10µg，用4-12% NuPage (Invitrogen)的lads - page分離得到擬南芥和水稻(2)的胞質(zhì)部分和核部分，并在硝酸纖維素上印跡1h。用含2%低脂乳粉的TBS-T (0.1% TWEEN 20)封濾1h，用含2%低脂乳粉的TBS-T中抗a12.2 (AS07 255, 1:1000, 1h)和二抗兔(1:20 000,1h)抗體(HRP偶聯(lián))進(jìn)行探針檢測。抗體孵育后用TBS-T洗滌(15，+5，+5，+5分鐘)。所有步驟均在RT時進(jìn)行攪拌。用化學(xué)發(fā)光試劑檢測信號，使用富士LAS-3000 CCD (300s，標(biāo)準(zhǔn)靈敏度)。該靶標(biāo)A12.2僅在擬南芥核提取物中特異性檢測到(3)。