擬南植物中重組actin的100個氨基酸保守率超過80%:actin-1 P0CJ46 AT2G37620、actin-2 Q96292 AT3G18780、actin-3 P0CJ47AT3G53750、actin-4 P53494 AT5G59370、actin-5 Q8RYC2 At2g42100、actin-7 Q96293 At5g09810、actin-8 Q96293 AT1G49240、actin-11 P53496、AT3G12110、actin-12 P53497 AT3G46520
主機的鼠標
單克隆重組
子類/同形像IgG1
親和純化,PBS pH 7.4
格式凍干
數量10µg
用10µl無菌或去離子水進行重組。
存儲
-20°C保存凍干/重組;一旦重組,就分成等分,以避免反復的凍融循環。請記住,在打開管之前,要簡短地旋轉管,以避免任何損失,可能發生的凍干材料粘附在帽或管的側面。
Western blot (WB)
推薦稀釋倍數1:1000 1:5000 (WB)
預期|表觀MW 41.6 | 45 kDa
新鮮從擬南芥葉片組織中提取總蛋白10µg/孔。圖中顯示的所有通道均來自于同時提取的不同擬南芥葉片樣本。新鮮葉片組織直接在1x Bolt LDS加載緩沖液(Thermo)和200mM DTT中研磨,在80°C變性10分鐘。樣品在12%的SDS-PAGE凝膠上分離,在100V下濕轉移轉移到硝化纖維素上1小時。用5%牛奶在TBST中攪拌,1h/RT阻斷印跡。印跡與Agrisera Mouse anti-actin單克隆抗體(AS21 4615)以1:1000稀釋,在5%牛奶中攪拌1h rt。印跡在TBS-T中攪拌沖洗3次,共5分鐘。然后將膜與二級抗小鼠HRP (Agrisera AS09 627)以1:10 000稀釋的牛奶在室溫下孵育1小時。按上述方法洗滌印跡,使用ECL試劑并按照制造商的建議觀察反應。在膠片曝光15秒后,肌動蛋白帶可見。