免疫原

擬南芥AHK2蛋白序列合成klh偶聯肽，TAIR: AT5G35750, UniProt: Q9C5U2

主機的兔子

單克隆多克隆

親和純化的血清在PBS, ph7,4

格式凍干

量50µg

復配時，加入50µl無菌水

-20°C保存凍干/重組;一旦重組，使公平，以避免重復凍融循環，請記住，在打開之前，旋轉管短暫，以避免任何損失，凍干材料粘附在瓶蓋或管的兩側

Western blot (WB)

推薦稀釋倍數1:10 00 (WB)

預期|表觀MW

131 kDa

野生型擬南芥(Arabidopsis thaliana, WS)和ahk2-2 T-DNA插入突變體植株在MS/2培養基上生長6 d。收集組織，冷凍于液氮中，置于3體積的2倍SDS-PAGE加載緩沖液中，并在95℃加熱5分鐘。在RT離心10分鐘后，每道20µl上清液用7.5% TGX凝膠(BioRad)加載。分離后，蛋白質被印跡1小時在一個支持的硝化纖維素膜上。用PBS-T中10%的牛奶在室溫(RT)攪拌下封閉印跡15分鐘。用一抗1:10 000稀釋于1%的PBS-T牛奶中，在4C條件下攪拌16小時。倒出抗體溶液，在PBS-T中攪拌洗滌3次，共15分鐘。用二抗(抗兔IgG馬蘿卜過氧化物酶偶聯)稀釋至1:20 00在PBS-T中攪拌，在RT中孵育1h。按上述方法洗滌斑點，并根據制造商的說明使用化學發光檢測試劑顯影5分鐘。化學發光信號的采集采用ChemiDoc和CCD相機。