擬南芥klh偶聯(lián)肽，UniProt Q9SYT0, TAIR AT1G35720

主機(jī)的兔子

單克隆多克隆

親和純化血清，PBS pH = 7,4

格式凍干

量50µg

復(fù)配時(shí)，加入50µl的無菌水

-20°C保存凍干/重組;一旦重組，使公平，以避免重復(fù)凍融循環(huán)，請(qǐng)記住，在打開之前，旋轉(zhuǎn)管短暫，以避免任何損失，凍干材料粘附在瓶蓋或管的兩側(cè)

Western blot (WB)

推薦稀釋倍數(shù)1:10 00 (WB)

預(yù)期|表觀MW 36 kDa(加工前)

重組Ann1 (1)， Ann4 OE(2)。擬南芥葉片在液氮中研磨，提取液為:Tris pH-8.0 (1M) 5%、EDTA pH-8.0 (0.5 M) 0.2%、β-巰基乙醇0.05%、PMSF(1%) 0.05%、Triton X-100 1%。每個(gè)樣品提取蛋白50µg，用蒸餾水稀釋，加入4 × laemli樣品緩沖液。樣品在95℃變性5 min，在12%的SDS-PAGE上分離。樣品在4℃、持續(xù)攪拌的條件下，采用槽式/濕式轉(zhuǎn)移法吸膜2 h至PVDF膜。印跡用封閉溶液(5%的干牛奶，1xTBS)在4℃下攪拌過夜。印跡在一抗中1:1000稀釋，在RT下攪拌1小時(shí)，加入5%的1xTBS的奶粉中。倒出抗體溶液，簡單沖洗印跡，然后在1xTBS中沖洗1次，每次15分鐘，在RT下攪拌3次，每次5分鐘。印跡在二抗(山羊抗兔IgG (HRP偶聯(lián)))中孵育，二抗稀釋至1:50 000，加入5%的奶粉，1xTBS, RT，攪拌1h。墨跡按上述方法洗滌，用化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑在暗室中顯影5min。曝光時(shí)間為10 min。