免疫原
klh結合擬南芥AP2序列合成肽,UniProt: P47927, TAIR: At4g36920
主機的兔子
單克隆多克隆
親和純化的血清在PBS, ph7,4
格式凍干
量50µg
復配時,加入50µl無菌水
-20°C保存凍干/重組;一旦重組,使公平,以避免重復凍融循環,請記住,在打開之前,旋轉管短暫,以避免任何損失,凍干材料粘附在瓶蓋或管的兩側
Western blot (WB)
推薦稀釋倍數1:10 00- 1:20 00 (WB)
預期|表觀MW 47,8 kDa
從干旱脅迫條件下生長的水稻(Oryza sativa)品系中提取1µg總蛋白和超表達蛋白DREB (AP2結構域,285 aa, 31.35 kDa)(品系1 ~ 5)和純化的DREB(品系6)100 ng,在12.5% SDS-PAGE上分離,并在硝酸纖維素膜上印跡4h。印跡阻斷劑為5% BSA或1X TBS, 0.1%吐溫-20加5% w/v脫脂奶粉,室溫(RT)攪拌1h。在一抗中以1:6 000稀釋后,在RT下孵育1h,或在4°C下攪拌過夜。倒出抗體溶液,簡單沖洗斑點兩次,然后在1XTBST中沖洗一次15分鐘,攪拌3 × 5分鐘。用二抗(Agrisera公司的抗兔IgG馬蘿卜過氧化物酶,AS09 602)稀釋至1:8000,RT或max孵育1h。與攪拌2 h。按上述方法沖洗污漬,并按照制造商的說明使用ECL顯影5分鐘。曝光時間最好在20 - 30秒或最多。1分鐘