免疫原

klh偶聯(lián)合成肽來源于植物、藻類(葉綠體和線粒體)和細菌f型ATP合酶beta亞基序列，包括擬南芥葉綠體ATP合酶beta UniProt: P19366, TAIR:AtCg00480、擬南芥線粒體ATP合酶亞基β -1、UniProt: P83483、TAIR: At5g08670、reinhardtii衣藻、UniProt: P06541、A8IQU3

主機雞

單克隆多克隆

純度IgY總

液體為23,3µg/µl，在PBS pH值8,0 + 0.02%疊氮鈉溶液中保存

數量100µl

儲存:2-8°C;請記住，在打開管道之前，要簡短地旋轉管道，以避免任何可能發(fā)生的損失，因為液體材料粘附在瓶蓋或管的側面

免疫定位(IL)，免疫金(IG)，免疫印跡(WB)

免疫金(IL)定位天然酶推薦稀釋1:500,1:5 000- 1:8 000 (WB)

預期|明顯MW

53.9 kDa(擬南芥)、51.7 kDa (synechocystipcc 6803)、53.7 kDa(菠菜)

用protein Extraction Buffer PEB (AS08 300)提取牛肉肌肉(1)、大鼠肝臟(2)、擬南芥葉(3)、Hordeum vulgare葉(4)、Synechocystis PCC 6803總細胞(5)、Synechococcus PCC 7942總細胞(6)10個總蛋白。樣品用1X樣品緩沖液(NuPAGE LDS樣品緩沖液(Invitrogen))稀釋，加入50mm DTT，在70C加熱5分鐘，并在加載前冷藏。蛋白樣品用Bolt 4-12% Tris-Bis凝膠(Invitrogen) LDS-PAGE分離，使用Bolt Mini Blot Module在PVDF上印跡1h - 1.5h。在2%阻斷試劑(GE RPN 2125;20 mM Tris, 137 mM氯化鈉pH 7.6, 0.1% (v/v) Tween-20 (TBS-T)在室溫下攪拌1h。將印跡置于一抗中，稀釋1:5 000(用封閉試劑)，室溫攪拌1h。將抗體溶液倒置，將印跡簡單沖洗兩次，然后用TBS-T在室溫下攪拌，分別沖洗1x15 min和3x5 min。印跡用二抗(抗雞IgY，馬蘿卜過氧化物酶偶聯(lián))稀釋到1:20 000的封閉劑中，室溫攪拌1h。污漬是按上面的方法洗的。使用Lumigen ECL超試劑(Lumigen TMA-6, Lumigen)檢測印跡中的信號，并使用Molecular Imager VersaDoc MP 4000系統(tǒng)(Bio-Rad)和Quantity One軟件(Bio-Rad)進行可視化。曝光時間為30秒。